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1、目的:采用復(fù)合因素建立大鼠肝纖維化模型,通過(guò)觀察研究增損甘露消毒丹對(duì)肝纖維化大鼠血清III型前膠原(PCIII)、IV型膠原(IV-C)及肝組織病理學(xué)的變化,探討增損甘露消毒丹抗肝纖維化的療效及作用機(jī)理,為進(jìn)一步的研發(fā)提供理論依據(jù)。 方法:采用四氯化碳(CCL4)皮下注射和酒精灌胃等復(fù)合因素建立大鼠肝纖維化模型:設(shè)A組正常對(duì)照組、B組病理模型組、C組增損甘露消毒丹小劑量組(2g/100g體重灌胃)、D組增損甘露消毒丹中劑量組(4
2、g/100g體重灌胃)、E組增損甘露消毒丹大劑量組(8g/100g體重灌胃)、F組復(fù)方鱉甲軟肝片組(復(fù)方鱉甲軟肝片0.625g/kg體重灌胃),治療各組連續(xù)用藥8周。治療結(jié)束后采用放射免疫法檢測(cè)大鼠血清III型前膠原(PCIII)、IV型膠原(IV.C)的含量。采用蘇木素-伊紅(HE)染色法和膠原纖維(Van-Gieson)染色法對(duì)各組大鼠肝組織切片分別染色,光鏡下觀察并進(jìn)行肝纖維化病理分級(jí);采用網(wǎng)狀纖維(Gomori)染色法對(duì)各組大鼠
3、肝組織切片染色,網(wǎng)狀纖維增生程度采用計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行分析,計(jì)算出各組大鼠肝組織網(wǎng)狀纖維面積百分比并進(jìn)行對(duì)比。 結(jié)果:1.增損甘露消毒丹對(duì)肝纖維化大鼠血清PCIII、IV-C含量的影響:與正常對(duì)照組比較,病理模型組大鼠血清PCIII、IV-C含量均明顯升高,具有極顯著性差異(P<0.01);增損甘露消毒丹大劑量組、增損甘露消毒丹中劑量組、復(fù)方鱉甲軟肝片組與病理模型組比較血清PCIII、IV-C含量均降低,有顯著性差異(P<0
4、.05);增損甘露消毒丹小劑量組與病理模型組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05);增損甘露消毒丹大劑量組、增損甘露消毒丹中劑量組、復(fù)方鱉甲軟肝片組之間比較無(wú)顯著性差異(P>0.05):增損甘露消毒丹大劑量組、增損甘露消毒丹中劑量組與增損甘露消毒丹小劑量組之間比較有顯著性差異(P<0.05)。 2.增損甘露消毒丹對(duì)肝纖維化大鼠肝組織網(wǎng)狀纖維染色定量分析的影響:與空白對(duì)照組比較,病理模型組網(wǎng)狀纖維染色面積/視野面積百分比明顯升高,具有極
5、顯著性差異(P<0.01);增損甘露消毒丹大劑量組、復(fù)方鱉甲軟肝片組較病理模型組網(wǎng)狀纖維染色面積/視野面積百分比明顯降低,具有極顯著性差異(P<0.01);增損甘露消毒丹中劑量組較病理模型組網(wǎng)狀纖維染色面積/視野面積百分比降低,具有顯著性差異(P<0.05):增損甘露消毒丹小劑量組與病理模型組網(wǎng)狀纖維染色面積/視野面積百分比比較,無(wú)顯著性差異(P>0.05);增損甘露消毒丹大劑量組與增損甘露消毒丹中劑量組比較,其網(wǎng)狀纖維染色面積/視野面
6、積百分比降低,有顯著性差異(P<0.05);增損甘露消毒丹大劑量組與復(fù)方鱉甲軟肝片組比較,其網(wǎng)狀纖維染色面積/視野面積百分比無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 結(jié)論:1、增損甘露消毒丹可以抑制細(xì)胞外間質(zhì)中膠原的生成,降低肝纖維化大鼠血清PCIII、IV.C的含量并能明顯減輕大鼠的肝纖維化程度、減少膠原纖維與網(wǎng)狀纖維,對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化有良好的治療作用。 2、在降低肝纖維化大鼠血清指標(biāo)(PCIII、IV.C)及改善肝
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