EGFR信號(hào)通路在黑色素瘤中調(diào)節(jié)紫杉醇耐藥和侵襲轉(zhuǎn)移機(jī)制探討.pdf_第1頁(yè)
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1、 本文用紫杉醇和/或EGFR抑制劑AG1478、ERK抑制劑PD98059、PI3K抑制劑LY290042分別作用黑色素瘤A375細(xì)胞，探討表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)信號(hào)通路與紫杉醇耐藥的關(guān)系及其作用機(jī)制；用EGF和/或EGFR抑制劑AG1478作用A375細(xì)胞，探討EGFR信號(hào)通路調(diào)節(jié)黑色素瘤侵襲與轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制。 方法：首先篩選出EGFR高表達(dá)A375細(xì)胞株，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。觀察細(xì)胞凋亡情況。分析細(xì)胞周期(

2、PI染色)和凋亡率情況。然后應(yīng)用Matrigel膠和MTT法進(jìn)行體外黏附實(shí)驗(yàn)。用Matrigel膠和Boyden小室進(jìn)行體外侵襲實(shí)驗(yàn)。最后用Western blot方法檢測(cè)P-EGFR，P-ERK，P-AKT，Bcl-2，Bax，Caspase-3蛋白表達(dá)。用半定量RT-PCR檢測(cè)MMP-2，MMP-9，TIMP-1，TIMP-2mRNA表達(dá)。 研究表明：1.紫杉醇以時(shí)間和劑量依賴方式抑制黑色素瘤生長(zhǎng)和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。通過(guò)激活黑色

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