PKCα通過調(diào)控netrin-1-UNC5B信號通路在腎癌發(fā)生發(fā)展中的作用.pdf

1、目的:
　　探討PKCα是否通過調(diào)控netrin-1/UNC5B信號通路在腎癌中發(fā)揮作用。
　　方法:
　　利用RT-PCR技術(shù)分別檢測三株惡性程度不同的腎癌細(xì)胞系786-O，ACHN，Caki-1中netrin-1和UNC5B的表達(dá)。通過Western-Blotting技術(shù)，檢測腎癌及其癌旁組織中netrin-1和UNC5B的表達(dá)。利用PKCα的激動劑PMA和抑制劑Calphostin C處理腎癌細(xì)胞系后，應(yīng)用MTT

2、技術(shù)檢測細(xì)胞增殖能力的改變情況。給予786-O細(xì)胞，ACHN細(xì)胞和769-P細(xì)胞PMA和Calphostin C處理后，利用RT-PCR技術(shù)檢測netrin-1和UNC5B的表達(dá)情況發(fā)生怎樣的改變。
　　結(jié)果:
　　UNC5B在腎腺癌細(xì)胞系786-O中存在高表達(dá)(P＜0.05);而netrin-1則是在具有高侵襲力的ACHN細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)(P＜0.05)。UNC5B在腎癌組織中的表達(dá)明顯低于癌旁組織(P＜0.05);而ne

3、trin-1則是在腫瘤組織中表達(dá)升高(P＜0.05)。觀察ACHN細(xì)胞用不同濃度PMA處理72h，隨著藥物濃度增大，細(xì)胞增長呈現(xiàn)先促進(jìn)后抑制的情況(P＜0.05);而隨著CalphostinC濃度逐漸升高，觀察72h，ACHN細(xì)胞增長呈現(xiàn)逐步抑制的情況(P＜0.05)。PMA處理腎癌細(xì)胞系24h后，UNC5B和netrin-1表達(dá)量明顯升高(P＜0.05)，而先用PMA預(yù)處理4h后，更換用CalphostinC處理24h，這種由PMA誘