亞硒酸鈉對桃樹、葡萄生理影響及桃葉片差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、以‘美碩’、‘特早紅’和‘春艷’桃為試材，分別用0、10、20、30mg·L-1濃度的亞硒酸鈉進(jìn)行葉面噴施，同時用0、25、50、75mg·L-1濃度的亞硒酸鈉將‘月光無核’、‘夏黑無核’、‘巨玫瑰’葡萄分別進(jìn)行葉面噴施，研究硒對果實品質(zhì)和光合作用的影響以及桃葉片差異蛋白組學(xué)，探明硒對葉片的多種生理生化效應(yīng)的影響，以期為葉面施硒改善果實品質(zhì)和對桃樹樹體的生理生化影響提供理論依據(jù)。本試驗通過雙向電泳和質(zhì)譜鑒定等蛋白質(zhì)組學(xué)的研究手段，分析與

2、比較富硒桃葉片和普通桃葉片中整體蛋白質(zhì)組表達(dá)的變化，尋找其中的差異蛋白，期待能夠揭示外源硒影響木本植物光合作用和生理功能的本質(zhì)規(guī)律和機制。
　　對桃果實部分而言，試驗結(jié)果如下：硒處理濃度以20mg·L-1為最佳；在0~20 mg·L-1范圍內(nèi)隨著外源硒濃度的增大，果實中可溶性糖、維生素 C和可溶性固形物含量上升，可滴定酸含量下降；施硒濃度達(dá)到30 mg·L-1，果實品質(zhì)下降。
　　對桃葉片部分而言，在適宜的硒濃度（20 mg

3、·L-1）下提高可溶性糖、可溶性蛋白、葉綠素的含量。以桃的正常葉片和富硒葉片為材料，通過樣品酚法制備、2-DE雙向電泳、以及質(zhì)譜鑒定技術(shù)，對施硒前后桃葉片進(jìn)行了蛋白質(zhì)組學(xué)的探索，并對硒處理對葉片造成的差異蛋白進(jìn)行了生物信息學(xué)的研究，結(jié)果如下：（1）正常桃葉片的雙向電泳結(jié)果圖中共檢測出1391個蛋白質(zhì)點。而富硒葉片中則共檢測出1204個蛋白質(zhì)點。硒處理后蛋白質(zhì)點減少了187個。（2）有33個蛋白點在表達(dá)量上有明顯的質(zhì)和量的變化。其中，11

4、個蛋白點上調(diào)表達(dá)，18個蛋白點下調(diào)表達(dá)，硒處理后葉片中卻失4個特異蛋白點。（3）選取23個表達(dá)差異大、點型好的蛋白進(jìn)行質(zhì)譜分析，都獲得了完整的肽指紋圖譜。將肽段數(shù)據(jù)導(dǎo)入NCBInr蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫，搜索鑒定出12個蛋白質(zhì)點。（4）通過 http://www.uniprot.org/對得到鑒定的蛋白進(jìn)行生物信息學(xué)分析，它們的功能位點大部分在葉綠體中，其中有3個蛋白點屬于 RuBisCO長鏈族；343號蛋白屬于光系統(tǒng)Ⅱ的放氧復(fù)合體，可維持光系統(tǒng)