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文檔簡介
1、新城疫病毒(NDV)、禽白血病病毒(ALV)、禽傳染性支氣管炎病病毒(IBV)、禽傳染性法氏囊病病毒(IBDV)是最常見的四種禽病的致病因子,給家禽養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。為初步了解野生鳥類中NDV、ALV、IBV、IBDV的病毒感染狀況,本實驗基于四種病毒基因組的特異性高度保守核酸序列,設(shè)計了四對通用引物,克隆得到目的片段重組質(zhì)粒,通過正交法優(yōu)化四重RT-PCR反應(yīng)體系,建立了可同時檢測NDV、ALV、IBV、IBDV的四重RT-
2、PCR檢測方法,并進行了特異性和靈敏度檢驗,最后對67只野生鳥類的四種臟器進行了實際樣本檢測。結(jié)果表明,該方法可以擴增得到大小不一的四種目的片段158 bp(NDV)、131 bp(IBV)、109 bp(ALV)、94 bp(IBDV);特異性實驗表明該方法可以有效檢出四種病毒任意混合樣品,但檢測不出馬利克病毒、禽痘病毒、禽減蛋綜合征病毒和禽流感病毒;靈敏度實驗表明該方法可檢出102 copy的pMD-18T-NDV,102 copy
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