2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、絨毛膜癌是一種高度惡性的發(fā)生于胎盤外層絨毛膜上皮細胞(即滋養(yǎng)葉細胞)的腫瘤,具有較強的侵襲轉移能力。近年來對轉移性腫瘤的研究逐漸聚焦于蛋白質翻譯后修飾(如糖基化、磷酸化、硫酸化等),特別是蛋白質的糖基化修飾,這種修飾的復雜多變性與惡性腫瘤轉移強弱是否有關備受關注。糖蛋白分子中不同的糖殘基是由細胞中催化糖殘基生成的各種糖基轉移酶和催化糖殘基降解的糖苷酶的活性來決定的,其中β-半乳糖α2,6-唾液酸轉移酶1(ST6Gal-Ⅰ)可催化活化的唾

2、液酸以α-2,6糖苷鍵的形式連接到細胞膜表面糖蛋白的N-乙酰半乳糖胺上。ST6Gal-Ⅰ的底物蛋白的α2,6唾液酸化會影響其自身結構及活性的變化,并參與細胞的遷移、粘附、增殖、凋亡等多種生物學活動。已有研究表明,ST6Gal-Ⅰ與多種腫瘤(如膠質瘤,卵巢癌,直腸癌等)的高轉移能力呈正相關。因此,探討腫瘤細胞膜上功能蛋白糖基化對腫瘤轉移活性影響的分子機制,對于揭示臨床上腫瘤轉移的機理、尋找新的分子標記物有著重要的意義。
  本研究以

3、人絨毛膜癌細胞系JAR和正常絨毛外滋養(yǎng)細胞HTR-8/Svneo為研究對象,采用熒光定量PCR、western blot、siRNA干擾、transwell等方法,檢測分析兩種細胞中ST6Gal-Ⅰ及其α2,6唾液酸化總蛋白的表達情況,初步探討了ST6Gal-Ⅰ對JAR細胞遷移能力的影響及其作用機制。所得研究結果如下:
  1.兩種細胞的生長形態(tài)差異明顯,HTR-8/SVneo主要呈梭形均勻分布生長舒展,而JAR細胞主要呈多邊形成

4、團生長且多突觸。
  2.Transwell小室實驗顯示JAR細胞的遷移能力明顯強于HTR-8/SVneo細胞。
  3.PCR、Western Blot和Lectin Blot方法檢測表明JAR細胞的ST6Gal-Ⅰ mRNA和蛋白表達以及α2,6唾液酸化總蛋白水平均高于HTR-8/Svneo細胞,與其遷移能力呈正相關。
  4.siRNA干擾JAR細胞的ST6Gal-Ⅰ后細胞的遷移能力明顯下降。經免疫共沉淀技術檢測

5、發(fā)現(xiàn)siRNA干擾組中整合素β1唾液酸化程度明顯下調。
  5.在JAR細胞中,經siRNA干擾后與整合素β1相關的FAK,AKT,ERK蛋白的活性形式均有明顯下調,而磷酸化ERK抑制劑處理細胞后能下調ST6Gal-Ⅰ及唾液酸化總蛋白的表達。
  綜上所述,人絨毛膜癌細胞(JAR)的遷移能力強于人正常絨毛外滋養(yǎng)層細胞(HTR-8/Svneo),可能與兩種細胞中ST6Gal-Ⅰ的蛋白表達的差異有關。ST6Gal-Ⅰ可通過上調整

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