Endostatin抑制NSCLC增殖及轉(zhuǎn)移效應(yīng)的觀察及其機(jī)制探討.pdf

1、肺癌的發(fā)病率在全世界范圍逐年上升，亦是死亡率最高的惡性腫瘤之一。非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)約占肺癌的80％，臨床確診時(shí)約有80％的患者已達(dá)晚期。在其治療中，化療仍扮演重要角色，但同一方案化療使用>3個(gè)周期時(shí)，臨床療效多為無變化(SD)或進(jìn)展(PD)，提示耐藥是肺癌中普遍存在的問題、因而往往導(dǎo)致治療失敗。 20世紀(jì)70年代初，F(xiàn)olkman提出了關(guān)于腫瘤依賴于血管發(fā)生的假設(shè)：早期腫瘤不依賴血管供養(yǎng)，但當(dāng)瘤塊直徑>1～2mm時(shí)，即可

2、分泌各種腫瘤血管發(fā)生因子(Tumor angiogenesis factor FAF)、引起血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移，在瘤塊內(nèi)形成新的毛細(xì)血管、保證腫瘤繼續(xù)生長(zhǎng)、特別是向遠(yuǎn)方轉(zhuǎn)移。因此，抑制腫瘤形成新生血管形成可能成為有效的治療手段。目前發(fā)現(xiàn)的抑制血管生長(zhǎng)因子主要有：干擾素、白介素12、白介素18、血小板因子4、腫瘤壞死因子、血小板反應(yīng)素、血管抑制素(Angiostatin)及內(nèi)皮抑制素(Endostatin)等。其中0‘Reilly等發(fā)

3、現(xiàn)的Endostatin較為理想，它能抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)其凋亡、抑制腫瘤形成新生血管。由于其靶細(xì)胞是基因型相對(duì)穩(wěn)定的血管內(nèi)皮細(xì)胞，很少發(fā)生變異，Endostatin不易誘發(fā)耐藥。此外，Endostatin與其他化療藥物聯(lián)合應(yīng)用還具協(xié)同作用。 由于Endostatin為腫瘤治療提供了更廣闊、更有希望的前景，許多國(guó)內(nèi)、外學(xué)者嘗試將其用于臨床治療。但迄今為止，對(duì)它的研究仍剛剛起步、許多問題懸而未決；主要包括： (1)E

4、ndostatin抗新生血管形成的作用細(xì)節(jié)是什么、這種作用能否轉(zhuǎn)化為活體中的抗腫瘤轉(zhuǎn)移效果? (2)除血管內(nèi)皮細(xì)胞外，Endostatin對(duì)腫瘤細(xì)胞有無直接效應(yīng)? 針對(duì)上述問題，進(jìn)行了相關(guān)的細(xì)胞和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體外和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究，報(bào)告如下： 目的： (1)觀察Endostatin對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的直接作用、并與化療藥物順鉑(DDP)的作用進(jìn)行了比較。 (2)觀察Endostatin對(duì)肺癌移植瘤生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)

5、移的影響并初步探討其作用機(jī)制。 方法： (1)通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察荷高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞之小鼠經(jīng)Endostatin和化療藥物。DDP作用后瘤體生長(zhǎng)情況(抑瘤率)以及原接種及肺轉(zhuǎn)移之瘤組織中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)和微血管密度(MVD)、肺轉(zhuǎn)移發(fā)生數(shù)量，并分析各指標(biāo)間的關(guān)聯(lián)性。 (2)通過細(xì)胞實(shí)驗(yàn)觀察Endostatin及DDP對(duì)人肺癌細(xì)胞株Calu-6細(xì)胞周期分布的影響與抑制率，并比較各種藥物及各劑量作用間的差

6、別。 結(jié)果： (1)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察證實(shí)：接種高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞之小鼠經(jīng)Endostatin作用后，抑瘤率DDP組為最高，與其它各組比較差異有顯著性(P<0.05)；400ug組和300ug組次之；200ug+DDP組再次；200ug組抑瘤作用最弱；原接種處之瘤組織中的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)明顯降低(P<0.05)，微血管密度(MVD)亦降低、但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；肺轉(zhuǎn)移灶之瘤組織中的VEGF和MVD均明顯降低(

7、P均<0.05)、肺轉(zhuǎn)移發(fā)生亦同時(shí)降低，各觀察指標(biāo)間具有正相關(guān)性。 (2)Endostatin可以直接抑制Calu-6肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，其抑制作用表現(xiàn)出時(shí)間依賴性而并未表現(xiàn)出劑量強(qiáng)度依賴性、且其作用弱于DDP。但并未觀察到Endostatin可以造成Calu-6肺癌細(xì)胞增殖周期分布的改變和明顯的凋亡現(xiàn)象。 結(jié)論： (1)Endostatin可降低原位移植瘤中的VEGF及轉(zhuǎn)移瘤中的VEGF和MVD、抑制遠(yuǎn)方轉(zhuǎn)移；

8、 (2)Endostatin可以直接抑制Calu-6肺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，其作用強(qiáng)度有時(shí)間依賴性而無明顯劑量依賴性，但不如DDP強(qiáng)烈。 創(chuàng)新點(diǎn)： (1)首次報(bào)告Endostatin可直接抑制Calu-6肺癌細(xì)胞增殖、抑制活體內(nèi)的腫瘤生長(zhǎng)，其作用強(qiáng)度有時(shí)間依賴性而無劑量依賴性。 (2)首次驗(yàn)證經(jīng)Endostatin作用后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的原位移植及轉(zhuǎn)移瘤中的VEGF、MVD及其與轉(zhuǎn)移發(fā)生間的關(guān)系(即Endostatin對(duì)轉(zhuǎn)移的預(yù)