唐草片與依非韋倫相互作用及對(duì)CYP450酶的調(diào)控研究.pdf

1、目的:艾滋病(AIDS)患者常用唐草片進(jìn)行輔助甚至替代治療，然而中藥成分復(fù)雜，其對(duì)抗病毒藥物的影響及其作用機(jī)制尚不清楚。為了減少潛在的藥物與藥物相互作用，臨床上推薦服用依非韋倫(EFV)1小時(shí)后再服唐草片。然而這種服用方式影響患者的依次性，本研究探討唐草片與EFV同時(shí)服用時(shí)，唐草片對(duì)EFV藥代動(dòng)力學(xué)的影響及作用機(jī)制;且在此基礎(chǔ)上深入研究唐草片對(duì)CYP450酶的影響。
　　方法:本研究首先研究不同給藥方式下唐草片對(duì)依非韋倫(EFV)

2、藥動(dòng)學(xué)特性的影響，將18只SD大鼠隨機(jī)分為三組:單獨(dú)服用EFV、EFV和唐草片同時(shí)服用、以及服用EFV60分鐘后服唐草片。用色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）法檢測(cè)EFV的血藥濃度。然后采用定量PCR技術(shù)研究唐草片對(duì)EFV代謝酶CYP450酶CYP1A1、CYP1B1、CYP2B1、CYP2B2、CYP2E1和CYP3A1的調(diào)控。此外，我們采用差速離心法分離肝微粒體，SDS-PAGE分離其蛋白質(zhì)，切取CYP450所在的三條電泳帶，用液相色

3、譜串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行鑒定。對(duì)鑒定的蛋白質(zhì)進(jìn)行生物信息學(xué)分析，Expasy blast搜索分析CYP2C11的特征多肽及限定片斷離子的m/z＜800，選擇CYP2C11中m/z為711.5的多肽進(jìn)行MRM定量分析，該多肽的離子對(duì)為:711.5→232.1、711.5→319.2、711.5→466.2和711.5→595.3;內(nèi)標(biāo)(IS)ESAT-6肽的離了對(duì)為:735.5→215.3、735.5→389.3、735.5→460.3和735.5

4、→524.3。采用相對(duì)峰（分析物/內(nèi)標(biāo)）面積進(jìn)行相對(duì)定量分析。
　　結(jié)果:我們研究了唐草片對(duì)EFV藥代動(dòng)力學(xué)的影響及作用機(jī)制。具體從以下二方面展開:
　　1)EFV以及唐草片單次給藥大鼠模型的藥代動(dòng)力學(xué)研究顯示:EFV單獨(dú)服用組、EFV和唐草片同時(shí)服用以及服用EFV60分鐘后服唐草片組中EFV的曲線下面積(AUC0-∞)分別為17.97、10.06和14.32 mg/l·h。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示:與EFV單獨(dú)服用相比，EFV和唐草

5、片同時(shí)服用時(shí)的曲線下面積(AUC0-∞)、半衰期（T1a）以及保留時(shí)間(MRT)顯著下調(diào)(p＜0.05)。當(dāng)EFV和唐草片同時(shí)服用時(shí)，唐草片顯著減低EFV的生物利用度和血漿半衰期，而在服用EFV60分鐘后服用唐草片，兩者的AUC0-∞接近，沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2)對(duì)EFV代謝相關(guān)代謝酶的定量PCR分析結(jié)果顯示:唐草片不影響EFV的6個(gè)CYP450代謝酶的mRNA水平。進(jìn)一步的蛋白質(zhì)組研究在肝微粒體中鑒定16個(gè)CYP450同工酶。