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文檔簡介
1、目的:通過對一年內(nèi)復(fù)發(fā)和三年內(nèi)未復(fù)發(fā)的胃癌患者的胃癌組織樣本進(jìn)行甲基化基因芯片篩選,探討表觀遺傳學(xué)在胃癌復(fù)發(fā)中的作用機(jī)制,篩選出甲基化程度存在明顯差異的基因,為發(fā)現(xiàn)用于鑒定胃癌復(fù)發(fā)的分子標(biāo)志物鑒定基礎(chǔ)。
方法;對手術(shù)切取得胃癌組織進(jìn)行HE染色,光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行病理學(xué)驗證。提取胃癌組織的總DNA進(jìn)行質(zhì)量控制。應(yīng)用甲基化基因芯片技術(shù)篩選出甲基化程度存在明顯差異的基因。隨機(jī)篩選出某一低甲基化修飾的基因,采用qRT—PCR技術(shù)鑒定其在
2、胃癌/肝癌細(xì)胞系與正常胃/肝細(xì)胞系中的表達(dá)差異。
結(jié)果:甲基化基因芯片篩選結(jié)果顯示,一年內(nèi)復(fù)發(fā)與三年內(nèi)未復(fù)發(fā)患者的胃癌組織相比。高甲基化的基因包括:MDP1、LGALS8、PRAMEF12、SLC8A2,低甲基化的基因包括:CNNM4、DGKZ、B4GALNT2、HS3ST3B1、FGF2、AGXT、PRSS3。與正常胃細(xì)胞系GES-1相比,胃癌細(xì)胞系BGC-823 CNNM4基因的表達(dá)增加,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)
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