白藜蘆醇甲基化衍生物對TNF-α誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞損傷的炎癥介質(zhì)及NF-κB的影響.pdf

1、動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是由多種病因造成的始發(fā)于動脈壁內(nèi)膜的一系列復雜分子和細胞改變的總結(jié)果，也是誘發(fā)一些諸如冠心病、心肌梗塞、腦梗塞等心腦血管疾病的主要原因。隨著人們生活方式的改變，由于AS病變引起的心腦血管疾病已經(jīng)成為全球第一位的死亡原因，因此對于AS發(fā)病機制的研究一直是心血管疾病研究的熱點。AS發(fā)病機制非常復雜，尚未完全清楚，目前認為存在多種學說，如脂質(zhì)浸潤學說、中層平滑肌細胞增生學說、血栓源學說以及血

2、流動力學學說等，但是這些都不能對．AS的發(fā)生提供滿意的解釋。 近年來對于AS炎癥學說這一機制的研究深受關(guān)注，認為炎癥反應貫穿于AS始終，在AS的發(fā)生發(fā)展中起著非常重要的作用。1999年Ross教授提出AS病變是一種動脈血管的慢性炎癥，各種危險因素都是通過誘導動脈炎癥反應而引發(fā)AS的，因此抑制炎癥反應是改善AS病變的重要措施。大量的研究已經(jīng)證實，微生物感染、氧化型低密度脂蛋白、細胞因子等因素可誘發(fā)動脈粥樣硬化形成過程中的早期炎癥

3、反應。血管壁的炎癥最初是對血管損傷的保護機制，通過炎性細胞如單核細胞、巨噬細胞增生保持機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。但如果炎癥未能及時消除則會對組織造成破壞而引起炎性纖維增生反應及脂質(zhì)的沉積，從而導致AS。大量研究表明動脈粥樣硬化早期炎癥病變的形成中最為重要的一個環(huán)節(jié)就是循環(huán)中單核細胞向血管內(nèi)皮細胞的聚集和跨內(nèi)皮細胞轉(zhuǎn)移，從而使內(nèi)皮細胞通過分泌炎癥介質(zhì)或調(diào)節(jié)白細胞在其表面的黏附而具備潛在的炎癥作用，因而在引發(fā)和擴大動脈的炎癥反應中起著關(guān)鍵的作用。核

4、轉(zhuǎn)錄因子NF-κB是血管炎性過程中的中心轉(zhuǎn)錄控制點，以NF-κB轉(zhuǎn)錄因子家族為調(diào)控中心的內(nèi)皮細胞活化及炎癥基因誘導途徑有可能成為有關(guān)危險因子促動脈粥樣硬化形成的共同途徑。同時在各種環(huán)境因素刺激下發(fā)生內(nèi)皮細胞活化和功能紊亂又是啟動動脈粥樣硬化炎癥反應的主要原因。 因此，研究藥物對內(nèi)皮細胞炎癥反應的影響，并探討其作用的分子機制可能是抗AS治療的新靶點，也可為開發(fā)干預內(nèi)皮細胞炎癥反應的抗AS新藥提供一條新思路。白藜蘆醇(Rersve

5、ratrol，RSV)，化學名為反式3,4′,5-三羥基二苯乙烯(3，4′，5-trihydroxystilbene)，屬于多酚類化合物，是葡萄屬植物產(chǎn)生的一種植物抗毒素，廣泛存在于葡萄、中藥虎杖等多種植物中。大量研究已經(jīng)證實：白藜蘆醇具有多種藥理效應如抗癌、抗衰老、抗炎、神經(jīng)保護以及良好的心血管保護作用，并且認為其在抗動脈粥樣硬化中具有很重要的作用。這一作用主要與其具有抗氧化和抗炎特性有關(guān)，而這一抗炎機制主要在于抑制轉(zhuǎn)錄因子NF-κB

6、和AP-1的活化，從而抑制炎癥相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄和表達。 近年來，隨著白藜蘆醇衍生物的不斷出現(xiàn)，研究者們發(fā)現(xiàn)其具有與白藜蘆醇相似的藥理活性，其中某些化合物的活性、選擇性及穩(wěn)定性均要強于白藜蘆醇，因而成為近年來研究的熱點。目前報道較多的是白藜蘆醇的甲基化衍生物，有研究發(fā)現(xiàn)甲基化白藜蘆醇(TMS，trans-3，5，4′-trimethoxystilbene)具有很強的抗血管生成作用，且藥理活性是白藜蘆醇的30-100倍，并具有很強的

7、血管靶向性。VEGF-R轉(zhuǎn)基因斑馬魚胚胎實驗也發(fā)現(xiàn)低濃度TMS(0.1 μM)可明顯抑制新生血管的生成。在大鼠嗜堿性白血病粒細胞(RBL-2H3)和外周血單核細胞的研究中還發(fā)現(xiàn)TMS可抑制一些細胞因子和組織因子的表達，且效果比白藜蘆醇作用都要強。在我們前期的預實驗中也發(fā)現(xiàn)TMS較白藜蘆醇有更好的抗黏附能力，但目前有關(guān)白藜蘆醇甲基化衍生物保護血管內(nèi)皮、抑制炎癥介質(zhì)以抗動脈粥樣硬化的作用與機制的研究尚未見報道?；谏鲜鲅芯浚緦嶒炓詣用}粥樣

8、硬化發(fā)病中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)---內(nèi)皮損傷及單核與內(nèi)皮細胞黏附作為切入點，利用培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞株，建立腫瘤壞死因子(TNF-α)誘導的血管內(nèi)皮細胞損傷模型，觀察白藜蘆醇甲基化衍生物對單核一內(nèi)皮細胞粘附的抑制作用，并從細胞粘附分子等炎癥介質(zhì)及其NF-κB信號通路初步探討白藜蘆醇甲基化衍生物保護血管內(nèi)皮、抗動脈粥樣硬化的炎性反應分子機制，為下一步體內(nèi)動物實驗的深入研究打下基礎(chǔ)。本研究的目的是觀察白藜蘆醇甲基化衍生物與對腫瘤壞死因子(TNF-α)