構(gòu)建基因工程骨髓源干細(xì)胞模擬GABA神經(jīng)元分泌功能的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文構(gòu)建基因工程骨髓源干細(xì)胞模擬GABA神經(jīng)元分泌功能的實(shí)驗(yàn)研究姓名：馬宏偉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)外科學(xué)指導(dǎo)教師：徐如祥姜曉丹20070510中文摘要可以適當(dāng)整合入整個(gè)CNS并穩(wěn)定表達(dá)外源基因，為包括癲癇在內(nèi)的CNS疾病提供新的治療手段。癲癇的發(fā)生與腦內(nèi)興奮性和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)的失衡相關(guān)。Y氨基丁酸(gammaaminobutyricacid，GABA)是腦內(nèi)最主要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，癲癇患者或癲癇模型動(dòng)物腦組織中

2、多存在GABA能神經(jīng)元不同程度的數(shù)量減少和神經(jīng)功能的不可逆性缺失，這提示如能向腦內(nèi)補(bǔ)充能夠分泌GABA的神經(jīng)細(xì)胞就有可能抑制癲癇的發(fā)作。谷氨酸脫羧酶(glutamieaciddecarboxylaseGAD)是GABA合成的限速酶，其催化谷氨酸(glutaminieacid，Glu)脫羧反應(yīng)生成GABA，因而GAD對(duì)于調(diào)節(jié)腦部興奮性和抑制性神經(jīng)遞質(zhì)功能平衡起著重要作用。在GAD的兩個(gè)亞型(GAD6s和GAD67)中，GAD67的減少對(duì)G

3、ABA遞質(zhì)合成和釋放的減少起主要作用，因此，聯(lián)合基因工程技術(shù)、NSCs培養(yǎng)技術(shù)和立體定向技術(shù)，將轉(zhuǎn)染GAD67基因的神經(jīng)干細(xì)胞移植入腦內(nèi)，增加GAD67的表達(dá)，可以促進(jìn)GABA的合成，達(dá)到抑制癲癇發(fā)作的目的。本研究分五部分進(jìn)行，重點(diǎn)探討體外條件下，利用基因工程技術(shù)改造骨髓基質(zhì)源性神經(jīng)干細(xì)胞(Bonemarrowstromacellsderivedneuralsterncells，BMSCsDNSCs)，探索構(gòu)建基因工程化成體專能干細(xì)胞模