急性高眼壓致大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷過程中TRPC4通道蛋白的表達變化.pdf

1、目的：目前青光眼的治療方案主要是采用抑制房水生成、促進房水循環(huán)、視神經(jīng)營養(yǎng)保護的藥物以及各種手術(shù)方法來降低眼壓，保護視神經(jīng)。除了視神經(jīng)受損，角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度在高壓刺激下也會降低，但臨床上缺乏早期對角膜內(nèi)皮細(xì)胞損傷的預(yù)防性治療，致使青光眼病人高眼壓急性發(fā)作后內(nèi)皮細(xì)胞密度明顯減少，以后在進行復(fù)雜的內(nèi)眼手術(shù)甚至使用抗青光眼藥物都極易引起角膜內(nèi)皮失代償。隨著近年來對角膜內(nèi)皮細(xì)胞壓力損傷機制的研究進展，大量新的治療靶點相繼被發(fā)現(xiàn)。本實驗首次研究在

2、急性高眼壓刺激作用下SD大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞中TRPC4通道的表達變化，結(jié)合TRPC4通道的生理功能，探討TRPC4通道與角膜內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的相關(guān)性。
　　方法：健康純種SD大鼠26只，雌雄兼?zhèn)洌S機分為空白對照組（13只）和實驗組（13只）?？瞻讓φ战M雙眼不造模，實驗組雙眼造急性高眼壓模型。1，熒光顯微鏡觀察臺盼藍-茜素紅染色后實驗組和對照組角膜內(nèi)皮細(xì)胞的變化，計算活細(xì)胞率；2，實時熒光定量PCR檢測TRPC4在RNA水平的表達變化；

3、3，HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察實驗組和對照組角膜內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)變化，同時觀察TRPC4通道在蛋白質(zhì)水平的表達變化。
　　結(jié)果：1，臺盼藍-茜素紅染色：實驗組角膜內(nèi)皮細(xì)胞六角形細(xì)胞數(shù)目減少，大量細(xì)胞受到破壞或者已死亡，活細(xì)胞率較對照組明顯降低，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。2，實時熒光定量PCR：實驗組TRPC4的RNA表達量是對照組的4倍。3，H E染色和免疫組織化學(xué)染色：實驗組角膜內(nèi)皮細(xì)胞密度降低，免疫組化染色均呈