Sirt1降低p66shc表達及在高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞衰老中的作用.pdf

1、SIRT1是一種依賴煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adeninedinucleotide，NAD）的去乙?；福╤istone deacetylase，HDAC）。它能調(diào)節(jié)細胞周期、凋亡、DNA損傷修復(fù)、衰老和基因沉默。SIRT1主要通過去乙酰化組蛋白和轉(zhuǎn)錄因子而發(fā)揮作用。但SIRT1在細胞和組織衰老中作用仍不清楚。p66shc是介導(dǎo)氧化應(yīng)激和凋亡的重要分子，p66shc-/-鼠不僅氧化應(yīng)激水平降低，壽命明顯延長，還能

2、抵御高血糖引起的內(nèi)皮細胞功能失常。本室之前的研究，證明了SIRT1的內(nèi)皮細胞特異性轉(zhuǎn)基因小鼠對抗高糖引起的內(nèi)皮細胞功能失常，并且還發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因小鼠中p66shc的表達顯著降低。因此我們推測：在內(nèi)皮細胞中，SIRT1能夠通過抑制p66shc保護高糖誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞衰老。
　　 我們在高糖條件下培養(yǎng)臍靜脈內(nèi)皮細胞（human umbilical vein endothelialcell，HUVEC），通過Ad-SIRT1感染細胞過表達S

3、IRT1，通過Ad-SIRT1 RNAi感染細胞干擾SIRT1，通過Ad-p66shc RNAi感染細胞干擾p66shc。我們發(fā)現(xiàn)：SIRT1過表達顯著降低高糖所引起的p66shc蛋白水平，同時顯著降低ICAM-1的表達水平和明顯升高MnSOD蛋白表達，并且細胞衰老的標記物PAI-1的表達也明顯降低；干擾SIRT1后能夠明顯增加p66shc的mRNA和蛋白水平表達，并且干擾SIRT1后高糖誘導(dǎo)的ICAM-1、PAI-1在mRNA和蛋白表

4、達均明顯升高，而MnSOD的表達明顯降低：干擾p66shc后，PAI-1的表達在mRNA和蛋白水平明顯降低，MnSOD的表達在mRNA水平和蛋白水平均明顯升高。而干擾p66shc能夠降低干擾SIRT1所引起PAI-1的表達升高和MnSOD的表達的降低。
　　 綜合上述結(jié)果可以得出結(jié)論：在高糖刺激下，SIRT1能夠通過抑制p66shc保護內(nèi)皮細胞。提示SIRT1-p66shc通路在抵御高血糖導(dǎo)致的內(nèi)皮細胞功能失常，防止內(nèi)皮細胞衰老