氯吡格雷與質(zhì)子泵抑制劑相互作用研究.pdf

1、目的：觀察氯吡格雷（clopidogrel，CLP）及其羧酸代謝物（SR26334）、奧美拉唑（omeprazole，OMZ）對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（humanumbilicalveinendothelialcell，HUVEC）全基因表達(dá)譜的影響；評(píng)價(jià)20mg奧美拉唑和10mg雷貝拉唑（rabeprazole，RPZ）對(duì)健康志愿者75mg氯吡格雷穩(wěn)態(tài)血藥濃度及藥效學(xué)的影響；回顧性分析質(zhì)子泵抑制劑（protonpumpinhibitor，P

2、PI）對(duì)老年冠心病（coronaryarterydisease，CAD）患者氯吡格雷治療預(yù)后的影響。
　　方法：第一部分10-5mol/L氯吡格雷及其羧酸代謝物、奧美拉唑分別與人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株共培養(yǎng)48h，運(yùn)用AffymetrixHU133Aplus2.0全基因組表達(dá)芯片，檢測(cè)三種藥物成分對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)譜的影響，分子注釋系統(tǒng)MAS3.0軟件對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行聚類(lèi)分析。實(shí)時(shí)定量多聚酶鏈反應(yīng)(realtimepolyme

3、rasechainreaction，RT-PCR)驗(yàn)證基因表達(dá)譜結(jié)果，Westernblotting驗(yàn)證相關(guān)蛋白水平的變化。第二部分18名中國(guó)健康成年志愿者入選三階段交叉研究，隨機(jī)給予氯吡格雷75mg、氯吡格雷75mg+奧美拉唑20mg或氯吡格雷75mg+雷貝拉唑10mg，每日1次，連續(xù)服藥1周，洗脫期2周。每階段第7天服藥后4小時(shí)采取血樣進(jìn)行氯吡格雷羧酸及活性代謝物濃度檢測(cè)。光比濁血小板聚集實(shí)驗(yàn)（lighttransmittancea

4、ggregometry，LTA）和血管舒張因子激活的磷酸蛋白磷酸化法（vasodilator-stimulatedphosphoprotein，VASP）分別檢測(cè)最大血小板聚集率（maximalplateletaggregation，MPA)和血小板反應(yīng)指數(shù)（plateletreactivityindex，PRI）。第三部分回顧2001年1月1日～2011年2月28日解放軍總醫(yī)院老年病房服用氯吡格雷冠心病患者合并使用質(zhì)子泵抑制劑情況及相

5、關(guān)臨床特征，一級(jí)終點(diǎn)為全因死亡，次級(jí)終點(diǎn)為心絞痛發(fā)作、再發(fā)心肌梗死（myocardialinfarction，MI）、接受再血管化治療、腦卒中、短暫性腦缺血發(fā)作（transientischemicattack，TIA）等心血管事件及出血并發(fā)癥。
　　結(jié)果：第一部分氯吡格雷作用內(nèi)皮細(xì)胞48h后，基因芯片分析篩選出差異表達(dá)大于1.5倍的基因508個(gè)，其中上調(diào)基因139個(gè)，下調(diào)基因369個(gè)，基因功能涉及蛋白結(jié)合、轉(zhuǎn)錄因子活性、鋅離子結(jié)合

6、、DNA依賴(lài)的轉(zhuǎn)錄的調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄、RNA剪接等生物過(guò)程；通過(guò)氯吡格雷羧酸作用，臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞差異表達(dá)大于1.5倍的基因235個(gè)，其中上調(diào)基因176個(gè)，下調(diào)基因59個(gè)，包括DNA依賴(lài)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、轉(zhuǎn)錄、從RNA聚合酶II啟動(dòng)子開(kāi)始轉(zhuǎn)錄的正調(diào)節(jié)、細(xì)胞周期、細(xì)胞分割、蛋白氨基酸去磷酸化等相關(guān)基因；奧美拉唑作用下，差異表達(dá)大于1.5倍的基因282個(gè)，其中上調(diào)基因236個(gè)，下調(diào)基因46個(gè)，基因功能聚類(lèi)涉及轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、細(xì)胞粘附、抗凋亡

7、、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等生物過(guò)程。RT-PCR和Westernblotting結(jié)果與基因芯片結(jié)果一致。第二部分與基線(xiàn)水平相比，75mg氯吡格雷使志愿者血小板聚集率顯著降低，20mg奧美拉唑和10mg雷貝拉唑的使用減弱了氯吡格雷的抗血小板作用。氯吡格雷抗血小板活性與其血漿活性代謝物濃度明顯相關(guān)，與羧酸代謝物濃度無(wú)線(xiàn)性相關(guān)關(guān)系。第三部分共入組分析服用氯吡格雷的老年冠心病患者1033名，單用氯吡格雷739例，氯吡格雷聯(lián)用PPI294例(奧美拉唑170例，

8、雷貝拉唑112例，埃索美拉唑12例)。單用氯吡格雷與合用PPI兩組患者全因死亡的發(fā)病密度分別為3.54/1000人月和4.23/1000人月，OR1.196(95％CI:0.777-1.842，P＞0.05)，終點(diǎn)事件發(fā)病密度比較無(wú)顯著差異（P>0.05）；對(duì)所有混雜因素進(jìn)行傾向評(píng)分，采用加權(quán)分析的方法再次比較，氯吡格雷聯(lián)用PPI較單用氯吡格雷全因死亡率及終點(diǎn)事件發(fā)生率無(wú)顯著差異（P>0.05）。Kaplan-Meier分析顯示不同PP

9、I對(duì)服用氯吡格雷患者生存和終點(diǎn)事件影響無(wú)明顯差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：氯吡格雷及其羧酸代謝物、奧美拉唑?qū)w外培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞基因表達(dá)產(chǎn)生一定的影響，提示奧美拉唑和氯吡格雷除抗血小板方面的相互作用外，還通過(guò)多條通路影響內(nèi)皮細(xì)胞的功能；奧美拉唑和雷貝拉唑通過(guò)減少氯吡格雷活性代謝產(chǎn)物的形成，減弱氯吡格雷的抗血小板作用；服用氯吡格雷的老年冠心病患者，合用PPI(主要是奧美拉唑和雷貝拉唑)對(duì)患者生存和心血管事件的發(fā)生沒(méi)有明顯影響