法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的設(shè)計、合成及藥理活性初篩.pdf

1、信號轉(zhuǎn)導通路與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程密切相關(guān)，細胞生物學與腫瘤遺傳學的快速發(fā)展為腫瘤研究提供了新的靶點，針對信號通路重要靶點的藥物設(shè)計已成為極具吸引力的抗腫瘤藥物研究熱點。
　　 Ras 蛋白是細胞外信號轉(zhuǎn)導的分子開關(guān)，控制細胞生長和增殖的信號通路，Ras蛋白以GTP結(jié)合（活化狀態(tài)）和GDP結(jié)合（失活狀態(tài)）兩種形式存在，若Ras 蛋白處于持續(xù)活化狀態(tài)，則可能引起細胞的異常增殖，導致腫瘤的發(fā)生。大約30%的人類腫瘤均存在Ras基因的

2、突變激活，包括90%的胰腺癌，50%的結(jié)腸癌，50%的甲狀腺癌等等。Ras 蛋白的生物學功能依賴于翻譯后的修飾，法尼基轉(zhuǎn)移酶是修飾過程的關(guān)鍵催化酶，法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑可通過阻斷膽固醇合成途徑中的中間體法尼基焦磷酸酯上的一個15 碳的類異戊二烯基團轉(zhuǎn)移到RAS 蛋白的CAAX 四肽結(jié)構(gòu)中的Cys 殘基上而阻礙Ras 蛋白膜定位與功能。目前已有部分抑制劑進入臨床研究，如SCH66336和R115777等。
　　 本課題的目的是設(shè)計合

3、成具有良好活性，低毒安全的法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑：
　　 1 FTI 藥效團模型的建立及目標化合物的設(shè)計利用計算機輔助藥物設(shè)計軟件Catalyst 構(gòu)建出FTI 藥效團模型，結(jié)合已知活性化合物的結(jié)構(gòu)，以對氨甲基苯甲酸為母體結(jié)構(gòu)進行設(shè)計，得到8個符合藥效團模型的化合物，利用藥效團模型預測了目標化合物的活性，并進行了類藥性分析。
　　 2 目標化合物的合成與結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)合微波輻射合成法與常規(guī)實驗方法以對氨甲基苯甲酸為原料，經(jīng)過酯化

4、，?；?，烷基化等反應(yīng)合成了8個化合物。反應(yīng)中采用了微波輻射合成新技術(shù)，以減少反應(yīng)時間，提高產(chǎn)率。利用IR、P1PH-NMR、P13PC-NMR等方法對目標產(chǎn)物產(chǎn)物進行了結(jié)構(gòu)確證。
　　 3 藥理活性初篩選取人肝癌細胞HepG2和人肺癌A549細胞為試驗瘤株，以5-氟尿嘧啶為陽性對照，采用MTT法進行目標化合物體外活性篩選實驗，結(jié)果表明多數(shù)化合物具有較好的抑瘤活性，部分化合物高濃度時活性高于陽性對照組，并驗證了與鋅離子結(jié)合基團對藥

5、理活性影響的重要性。
　　 4 藥效團模型的驗證將目標化合物的藥理實驗結(jié)果與FTI 藥效團模型的活性預測值進行比較，證明藥效團模型具有一定的可靠性和預測能力，對FTI的設(shè)計具有指導意義。
　　 5 課題特點
　　 ⑴構(gòu)建了FTI 藥效團模型，并驗證了模型具有較好的活性預測能力。
　　 ⑵利用藥效團模型設(shè)計并合成出8個未見文獻報道的對氨甲基苯甲酸衍生物。
　　 ⑶體外抗腫瘤活性實驗結(jié)果表明多數(shù)化合物