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文檔簡介
1、目前從天然藥物中挖掘和尋找新的針對胰島素抵抗和2型糖尿病的藥物已成為國內(nèi)外的研究熱點。黃芪是中醫(yī)臨床上最常用的治療糖尿病的中藥之一,黃芪甲苷是中藥黃芪中的單體成份,本課題組前期工作發(fā)現(xiàn)黃芪甲苷可抑制脂肪細胞脂解,改善脂肪細胞的胰島素抵抗。那么,黃芪甲苷對胰島素敏感的其它外周組織,如人體最大器官的骨骼肌,是否也有作用呢?眾所周知,脂肪外組織特別是肌肉組織脂質(zhì)堆積是胰島素抵抗的重要因素,本研究應(yīng)用C2C12骨骼肌細胞模型來觀察黃芪甲苷對骨骼
2、肌細胞糖脂代謝的影響。 目的:培養(yǎng)C2C12骨骼肌細胞,觀察黃芪甲苷對骨骼肌細胞糖脂代謝的影響,探尋黃芪甲苷調(diào)節(jié)糖脂代謝的細胞和分子機制,更好地為黃芪甲苷防治2型糖尿病及其相關(guān)疾病提供實驗依據(jù)和臨床運用指導(dǎo)。 方法: 在分化成熟的C2C12骨骼肌細胞中用棕櫚酸孵育16h,造體外胰島素抵抗模型,進行3H-葡萄糖轉(zhuǎn)運測定,觀察黃芪甲苷對胰島素抵抗及非胰島素抵抗模型的葡萄糖轉(zhuǎn)運的影響。應(yīng)用細胞膜蛋白分離方法觀察Glut
3、4的轉(zhuǎn)位,免疫印跡檢測胰島素信號通路關(guān)鍵蛋白Irb,IRS-1,Akt和與胰島素信號傳導(dǎo)密切聯(lián)系的NF-kB 炎癥通路中關(guān)鍵蛋白的活性變化。 結(jié)果: 1.黃芪甲苷呈劑量及時間依賴促進C2C12骨骼肌細胞基礎(chǔ)及胰島素刺激下的葡萄糖轉(zhuǎn)運,并可改善棕櫚酸誘導(dǎo)的C2C12骨骼肌細胞糖轉(zhuǎn)運的下降。 2.黃芪甲苷可提高基礎(chǔ)及胰島素刺激下IRS-1和Akt的磷酸化水平,并拮抗棕櫚酸引起的磷酸化下降,但是對Irb磷酸化卻無影響;
4、黃芪甲苷可促進基礎(chǔ)及胰島素刺激下的細胞Glut4由胞漿至胞膜的轉(zhuǎn)位,并可抑制棕櫚酸干預(yù)下Glut4轉(zhuǎn)位及表達的減少。 3.黃芪甲苷能抑制棕櫚酸引起的NF-kB通路中IKK的磷酸化程度升高及IkBα的降解,并可降低棕櫚酸導(dǎo)致的C2C12骨骼肌細胞TNFa,IL-6,MCP-1mRNA的表達增加。 4. 黃芪甲苷降低C2C12骨骼肌細胞的氧消耗。 5. 黃芪甲苷可促進AMPK的磷酸化激活。 結(jié)論: 黃
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