睪酮介導(dǎo)的雄激素受體胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、【背景】：雄激素及雄激素受體（Androgen receptor，AR）其對(duì)男性生殖功能和精子的發(fā)生至關(guān)重要。細(xì)胞膜上的AR參與了雄激素的非經(jīng)典途經(jīng)作用，但是細(xì)胞膜上是否存在AR仍存在爭(zhēng)議，膜上AR的具體作用尚未完全明確。
　　【目的】：探究雄激素介導(dǎo)的AR胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)分子機(jī)制。
　　【方法】：使用蛋白免疫印跡（Western blot，WB）和免疫熒光技術(shù)驗(yàn)證TM4（一種小鼠睪丸支持細(xì)胞系）在睪酮刺激后胞內(nèi)AR的定位改變。采用

2、磷酸化抗體芯片檢測(cè)參與AR膜轉(zhuǎn)運(yùn)的蛋白磷酸化，運(yùn)用各類蛋白激酶拮抗劑驗(yàn)證并探究各蛋白激酶之間相互作用與AR膜轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)系。
　　【結(jié)果】：生理濃度的睪酮（10 nM）可以引起TM4細(xì)胞質(zhì)中AR的快速向細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)。我們進(jìn)一步研究AR快速轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，采用磷酸化抗體芯片，發(fā)現(xiàn)睪酮刺激引起MEK1/2(Ser217/221)，Akt(Ser473)和Erk1/2(Thr202/Tyr204)等位點(diǎn)的快速磷酸化。抑制MEK和Akt信號(hào)通路可以阻

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