質(zhì)粒介導(dǎo)16SrRNA甲基化酶在奇異變形桿菌臨床分離株的流行情況研究.pdf

1、目的： 調(diào)查從我院患者臨床標(biāo)本中分離的奇異變形桿菌對(duì)氨基糖苷類藥物的耐藥情況，檢測(cè)16SrRNA甲基化酶在奇異變形桿菌臨床分離株中的流行情況。 方法： 收集我院2004年5月至2007年9月198株從臨床標(biāo)本中分離的奇異變形桿菌，所有菌株均為非重復(fù)株。菌種鑒定和初步藥敏試驗(yàn)采用全自動(dòng)微生物分析儀，對(duì)慶大霉素、阿米卡星和妥布霉素任一耐藥的菌株被篩選為測(cè)試菌株。采用K-B法和瓊脂稀釋法對(duì)氨基糖苷類藥物進(jìn)行進(jìn)一步藥敏試

2、驗(yàn)。超廣譜β內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè)采用雙紙片擴(kuò)散法。使用PCR檢測(cè)16SrRNA甲基化酶基因、整合酶基因和ESBL基因。接合試驗(yàn)和轉(zhuǎn)化試驗(yàn)檢測(cè)質(zhì)粒的可轉(zhuǎn)移性；采用質(zhì)粒中量抽取試劑盒抽取16SrRNA甲基化酶基因陽(yáng)性株的質(zhì)粒，研究耐藥質(zhì)粒譜。采用Southern hybirdization證實(shí)16SrRNA甲基化酶基因是否位于質(zhì)粒上。 結(jié)果： 198株奇異變形桿菌中，21株至少耐一種氨基糖苷類藥物，被篩選為16S rR

3、NA甲基化酶基因陽(yáng)性可疑株。其中21株耐慶大霉素，耐藥率為10.6％(21/198)；19株耐藥妥布霉素，耐藥率為9.6％(19/198)；6株耐阿米卡星，耐藥率為3.0％(6/198)。6株耐阿米卡星株同時(shí)耐慶大霉素和妥布霉素。21株耐氨基糖苷類藥物的菌株有9株分離自痰液，7株分離自尿液，5株分離自創(chuàng)面膿液。經(jīng)PCR檢測(cè)和DNA測(cè)序，5株16S rRNA甲基化酶基因陽(yáng)性，陽(yáng)性率為2.5％(5/198)，其中1株armA陽(yáng)性、4株rmt

4、B陽(yáng)性。RmtA、rmtC、rmtD和npmA均為陰性。所有甲基化酶基因陽(yáng)性株對(duì)慶大霉素、妥布霉素和阿米卡星同時(shí)耐藥且都為高度耐藥(MICs，≥256mg/L)，5株甲基化酶基因陽(yáng)性菌株有1株產(chǎn)ESBLs，ESBL基因?yàn)镃TX-M-14。5株均為Ⅰ類整合酶基因陽(yáng)性。4株通過(guò)接合試驗(yàn)把質(zhì)粒傳遞給受體菌E.coli J53。5株甲基化酶基因陽(yáng)性株通過(guò)Southern hybirdization證實(shí)均位于質(zhì)粒上。 結(jié)論： 本次