慢性缺氧-再氧合對(duì)小鼠腦Nip3、細(xì)胞凋亡及β-淀粉樣蛋白沉積的影響.pdf

1、目的：研究慢性缺氧/再氧合對(duì)小鼠腦Nip3的表達(dá)、細(xì)胞凋亡及β-淀粉樣蛋白沉積的影響，探索睡眠呼吸暫停綜合征腦損害的可能機(jī)制。 方法：自制模擬睡眠呼吸暫停綜合征慢性缺氧/再氧合小鼠模型：通過控制程序調(diào)控箱內(nèi)氧濃度，使得每一缺氧/再氧合循環(huán)時(shí)間為2min，氧濃度循環(huán)于(21.72±0.55)％與(6.84±0.47)％之間，每天缺氧/再氧合8h。30只ICR小鼠隨機(jī)分為4組：模擬對(duì)照組10只，缺氧/再氧合20只，分為三組即缺氧/再

2、氧合2周組及4周組各5只，缺氧/再氧合8周組10只。原位末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測(cè)腦凋亡細(xì)胞；免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)小鼠腦組織Nip3、β-淀粉樣蛋白的表達(dá)；透射電鏡觀察神經(jīng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。 結(jié)果：TUNEL法檢測(cè)的凋亡神經(jīng)細(xì)胞主要位于腦皮質(zhì)層，其他部位分布稀少，免疫組化結(jié)果顯示Nip3在全腦神經(jīng)細(xì)胞均可表達(dá)，但以皮質(zhì)層明顯：缺氧/再氧合各組凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)較模擬對(duì)照組均增加(P<0.01)，8周組與4周組凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)較2周組亦增

3、加(P<0.01)，均數(shù)曲線說明腦皮質(zhì)層凋亡神經(jīng)細(xì)胞數(shù)開始時(shí)隨缺氧/再氧合時(shí)間延長(zhǎng)而增加，8周時(shí)達(dá)高峰，但8周組與4周組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；缺氧/再氧合各組腦Nip3的表達(dá)較模擬對(duì)照組均增加(P<0.01)，8周組與4周組腦Nip3的表達(dá)較2周組亦增加(P<0.01)，均數(shù)曲線說明腦Nip3的表達(dá)開始時(shí)隨缺氧/再氧合時(shí)間延長(zhǎng)而增加，4周時(shí)達(dá)高峰， 8周時(shí)有下降的趨勢(shì)，但8周組與4周組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

4、；腦Nip3表達(dá)與腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡之間存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.901，P<0.05)；β-淀粉樣蛋白在模擬對(duì)照組和缺氧/再氧合各組小鼠腦內(nèi)均呈陰性表達(dá)；電鏡觀察：與模擬對(duì)照組比較，缺氧/再氧合8周組較多的神經(jīng)細(xì)胞凋亡、線粒體腫脹，脂褐素沉積，髓鞘變性等病理改變。 結(jié)論：慢性缺氧/再氧合可上調(diào)大腦皮層促凋亡蛋白Nip3表達(dá)，并引起腦皮層神經(jīng)細(xì)胞損傷，表現(xiàn)為神經(jīng)細(xì)胞凋亡、線粒體腫脹、脂褐素沉積、神經(jīng)髓鞘退行性變等超微結(jié)構(gòu)改變，這可能是