Klotho通過VEGFR2-PAK1信號(hào)通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞失巢凋亡抵抗的分子機(jī)制研究.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文K l o t h o 通過V E G F R 2 ／P A K l 信號(hào)通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞失巢凋亡抵抗的分子機(jī)制研究專 業(yè)： 生物化學(xué)與分子生物學(xué)碩士研究生： 陳琳導(dǎo) 師：導(dǎo)師組成員：顧建新教授／’徐潔杰副研究員劉海鷗講師二零一三年四月 一苓一二，牛四月復(fù)旦大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院基因研究中心復(fù)旦大學(xué)2 0 1 3 屆碩士學(xué)位論文中文摘要K l o t h o 最早被認(rèn)為是一個(gè)衰老抑制基因，并且K l o t h o 基因缺陷

2、的小鼠表現(xiàn)為衰老樣表型。盡管最近有研究報(bào)道證實(shí)K l o t h o 基因在許多惡性腫瘤中發(fā)揮抑制腫瘤發(fā)生的作用，但是其在肝癌發(fā)生過程中的作用仍鮮為人知?！诒疚难芯恐校? 2 例隨訪的肝癌病人的組織標(biāo)本中，K l o t h o 的免疫組化染色結(jié)果表明K l o t h o 的表達(dá)與肝硬化，腫瘤的多樣性以及靜脈侵襲相關(guān)，并且高表達(dá)K l o t h o 的肝癌病人的總體生存明顯低于低表達(dá)K l o t h o 的肝癌病人。此外，K

3、l o t h o 高表達(dá)能促進(jìn)肝癌細(xì)胞遷移，非粘附依賴性生長(zhǎng)和失巢凋亡抵抗。K l o t h o的高表達(dá)能促進(jìn)P 2 1 活化蛋白激酶1 口2 1A c t i v a t e d K i n a s e1 ，P A K l ) 的活化，當(dāng)用s h R N A 干擾P A K l 的表達(dá)和用P A K l 激酶活性缺失的突變體P A K lK 2 9 9 R 或P A K l 的抑制劑抑制P A K l 的激酶活性能逆轉(zhuǎn)K l o

4、t h o 所誘導(dǎo)的失巢凋亡抵抗。特別值得注意的是，K l o t h o 過表達(dá)后能增加V E G F R 2 的表達(dá)，當(dāng)用V E G F R 2 的抑制劑A x i t i n i b 或其中和性抗體處理細(xì)胞后能降低K l o t h o 所引起的失巢凋亡抵抗，但是當(dāng)共轉(zhuǎn)P A K l 組成型激活的突變體P A K lT 4 2 3 E 后能逆轉(zhuǎn)A x i t i n i b 處理所增加的失巢凋亡。當(dāng)干擾掉K l o t h o 的

5、表達(dá)后能降低由V E G F R 2 ／P A K l 信號(hào)通路所引起的失巢凋亡抵抗，此過程可以被共轉(zhuǎn)P A K lT 4 2 3 E 所逆轉(zhuǎn)。這些研究結(jié)果表明K l o t h o 可以通過V E G F R 2 ／P A K l 這個(gè)信號(hào)通路發(fā)揮促癌基因的作用，促進(jìn)肝癌細(xì)胞失巢凋亡抵抗，腫瘤轉(zhuǎn)移和侵襲，從而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展，進(jìn)而為肝癌轉(zhuǎn)移提供了一個(gè)新的分子靶向。關(guān)鍵詞：K l o t h o ，P A K l ，V E G F R 2