伴有t(6;11)(q27;q23)易位的裸小鼠高致瘤性人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系SHI-1的建立和鑒定.pdf

1、該研究擬通過對(duì)急性髓性白血病(AML)患者原代白血病細(xì)胞的體外培養(yǎng),建立有特異性染色體異常的AML細(xì)胞系,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行較為全面的鑒定,為白血病或其它腫瘤研究提供一個(gè)有價(jià)值的研究工具.結(jié)論:(一)報(bào)道1例伴有t(6;11)(q27;q23)易位和早期復(fù)發(fā)時(shí)出現(xiàn)核型演變的AML-M5b病例,并對(duì)其進(jìn)行了深入的遺傳學(xué)研究.結(jié)果證實(shí)該例為伴有導(dǎo)致MLL-AF6重排的t(6;11)易位和導(dǎo)致1個(gè)p53等位基因缺失的del(17)(p11)

2、核型演變同時(shí)伴有另一p53等位基因點(diǎn)突變的急性單核細(xì)胞白血病,二者均和該例的不良預(yù)后有關(guān).(二)從1例AML-M5b病例建立1株人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系SHI-1,形態(tài)學(xué)和免疫表型呈現(xiàn)典型的單核系特征.SHI-1伴有特異性的染色體易位t(6;11)(q27;q23),RT-PCR檢出MLL/AF6,FISH檢測(cè)也顯示MLL基因在易位中被累及.M-FISH在傳代至2003年3月3日的SHI-1細(xì)胞中檢出隱匿性的7號(hào)和13號(hào)染色體之間的易位和

3、8號(hào)染色體來源的微小體.應(yīng)用p53基因探針進(jìn)行的FISH證實(shí)SHI-1細(xì)胞存在p53基因的缺失,PCR產(chǎn)物的測(cè)序結(jié)果顯示另一位點(diǎn)p53基因的5號(hào)外顯子存在TCC→CCC的點(diǎn)突變.明膠酶譜分析顯示SHI-1細(xì)胞上清中有較高濃度MMP-2和MMP-9的分泌,其中MMP-2可能與SHI-1細(xì)胞較強(qiáng)的遷移能力有關(guān).EB病毒和支原體污染被排除.STR-PCR證實(shí)SHI-1細(xì)胞和原代白血病細(xì)胞來自同一體.SHI-1細(xì)胞具有較強(qiáng)的集落形成能力.IL-

4、4和IL-5可促進(jìn)SHI-1細(xì)胞的增殖,IFN-γ、TNFα、IL-2、PDGF和IL-7可抑制SHI-1細(xì)胞的增殖.(三)SHI-1細(xì)胞存在著多藥耐藥,其中對(duì)VP16最為明顯,其耐藥機(jī)制可能與LRP和GST-Π的高表達(dá)有關(guān).(四)SHI-1細(xì)胞在裸小鼠皮下有很強(qiáng)的致瘤性.(五)TB對(duì)SHI-1細(xì)胞具有誘導(dǎo)分化和凋亡的雙向調(diào)節(jié)作用.TPA可誘導(dǎo)SHI-1細(xì)胞分化和貼壁.0.5mM、1.0mM和2.0mM As<,2>O<,3>可誘導(dǎo)SH