化學(xué)性缺血導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的機(jī)制探討及葛根素保護(hù)作用的觀察.pdf

1、Caspase家族在細(xì)胞凋亡中發(fā)揮著非常重要的作用,該實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察四種Caspase抑制劑對(duì)化學(xué)性缺血造成體外培養(yǎng)的牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞損傷的影響,希望能進(jìn)一步明確缺血性內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制,為研制血管保護(hù)性藥物提供理論線索.研究了葛根素對(duì)缺血性內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.該實(shí)驗(yàn)觀察了其對(duì)缺血缺氧狀態(tài)下內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的作用,希望進(jìn)一步明確其治療作用的機(jī)制,并為治療新的適應(yīng)癥提供理論參考.該實(shí)驗(yàn)以氰化鈉合并無(wú)糖培養(yǎng)基造成化學(xué)性缺血缺氧模型,在此基

2、礎(chǔ)上,進(jìn)行臺(tái)盼蘭染色觀察細(xì)胞的受損死亡情況;采用DNA瓊脂糖凝膠電泳、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記(TUNEL)技術(shù)檢測(cè)凋亡細(xì)胞DNA的斷裂;采用流式細(xì)胞儀分析技術(shù)監(jiān)測(cè)特異性凋亡峰;進(jìn)行Hoechst33342染色觀察凋亡細(xì)胞染色質(zhì)凝聚現(xiàn)象,并通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)染色方法觀察受損內(nèi)皮細(xì)胞Caspase-3的表達(dá).結(jié)果提示,Caspase抑制劑至少通過(guò)減少細(xì)胞DNA斷裂和染色體凝聚而減輕化學(xué)性缺血對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,在缺血性內(nèi)