細(xì)胞膜水通道蛋白Aquaporin-1與缺血后心肌水轉(zhuǎn)運(yùn)及心肌血管生成的關(guān)系.pdf

1、目的：1．在動(dòng)物心肌缺血模型中觀察心肌aquaportin-1(AQP1)蛋白在心肌組織中的表達(dá)規(guī)律及缺血后水通道AQP1 mRNA及蛋白在心肌組織中表達(dá)變化。 2．探討AQP1蛋白的水跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能與缺血后心肌水腫的關(guān)系。 3．初步探討AQP1蛋白與缺血后心肌血管生成及組織修復(fù)的關(guān)系。 方法：建立兔心肌缺血模型。設(shè)假手術(shù)組為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蛯?duì)照組。設(shè)經(jīng)乙酰唑胺處理的假手術(shù)組及缺血模型組為干預(yù)對(duì)照組(設(shè)不同劑量組，分組詳見

2、第一部分的材料和方法部分)。在設(shè)定的時(shí)間點(diǎn)收獲實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的心肌組織標(biāo)本。以抗AQP1特異性免疫組化考查AQPl在心肌中組織分布特點(diǎn)；以Real-time PCR及Westem blotting了解在缺血狀態(tài)下心肌組織AQP1基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)；采用Evan’blue定量測(cè)定法了解缺血心肌組織中毛細(xì)血管通透性的變化及用心肌水含量測(cè)定法了解缺血心肌的水腫程度；對(duì)心肌標(biāo)本行CD31特異性免疫組化染色，進(jìn)行毛細(xì)胞血管密度以了解心肌血

3、管生成的活躍程度。結(jié)合心肌Evan’blue及TTC染色了解缺血心肌梗塞面積/缺血面積(I/R)的比值。 結(jié)果：1．AQP1在心肌中分布廣泛，并且主要分布于心肌血管及心肌細(xì)胞膜。缺血造成AQP1在心梗邊緣區(qū)心肌的mRNA及蛋白表達(dá)呈現(xiàn)增高的趨勢(shì)。乙酰唑胺對(duì)模型動(dòng)物的處理造成AQP1蛋白表達(dá)的下降但是對(duì)AQP1 mRNA沒有明顯的影響。 2．缺血后心肌迅速出現(xiàn)組織水腫，乙酰唑胺干預(yù)可以抑制心肌水腫的程度。在一定時(shí)間范圍內(nèi)心

4、肌水腫的程度與AQP1蛋白的表達(dá)量相關(guān)。 3．心肌缺血后心梗邊緣毛細(xì)血管密度出現(xiàn)升高，乙酰唑胺處理的缺血組毛細(xì)血管密度出現(xiàn)下降，同時(shí)伴隨著I/R比值的下降。心肌缺血后AQP1蛋白的表達(dá)量與缺血心肌中毛細(xì)血管密度有關(guān)，同時(shí)，AQP1蛋白含量與組織修復(fù)程度有關(guān)。 結(jié)論：兔心肌組織各房室皆在著．AQP1蛋白的表達(dá)，組織定位主要位于血管內(nèi)皮細(xì)胞及心肌細(xì)胞上。心肌缺血造成AQP1基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)一過性增高。乙酰唑胺的處理不影響A