2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、高等植物是數(shù)以百萬計天然產(chǎn)物的來源,所含的化合物往往具有特定功能,其中許多具有可被人類利用的生物活性價值,可為新藥開發(fā)提供先導化合物,或作為生物醫(yī)學研究的重要工具。本研究通過體外細胞模型,利用細胞毒MTT法,從32科52屬56種藥用植物中篩選出葉下珠、珠子草、使君子、鴉膽子和千里光等5種具有明顯抗腫瘤效果的藥用植物,以及星蘋果、人心果、油梨和文丁果等4種亞熱帶地區(qū)境外引種的植物也具有明顯抗癌效果,明確抗腫瘤植物的活性部位;利用酪氨酸酶多

2、巴速率氧化法測定模型,篩選到蔓荊子、葉下珠和珠子草等3種中草藥,以及星蘋果、文丁果和人心果等3種亞熱帶地區(qū)境外引種植物對蘑菇酪氨酸酶具有抑制作用。
   根據(jù)抗癌篩選結(jié)果,確定珠子草抗癌活性部位為乙酸乙酯層和正丁醇層。利用天然產(chǎn)物化學研究方法,從珠子草乙酸乙酯層分離到活性物質(zhì),通過波譜鑒定化合物結(jié)構(gòu)為短葉蘇木酚酸乙酯,其對SMMC7721和Bel-7402兩種肝癌細胞作用72h的IC50值分別為35.89±3.99μg/mL和2

3、4.31±0.66μg/mL,而對正常肝細胞Chang-liver的IC50值為73.49±9.18μg/mL;從珠子草正丁醇層分離到活性物質(zhì),通過波譜鑒定化合物結(jié)構(gòu)為柯里拉京,其對SMMC7721和Bel-7402兩種肝癌細胞作用72h的IC50值分別為19.67±2.76μg/mL和13.56±0.47μg/mL,而對正常肝細胞Chang-liver的IC50值為92.22±4.29μg/mL。
   對于絞股藍研究,首先通

4、過HPLC分析確定用75%乙醇溶液提取絞股藍總皂苷(GYP),45%乙醇提取極性絞股藍皂苷(GYP1),90%乙醇提取弱極性絞股藍皂苷(GYP2);正交實驗結(jié)果表明在70℃水浴中以30倍量的45%乙醇加熱提取12 h為最佳條件提取GYP1,在60℃水浴中以30倍量的90%乙醇加熱提取6 h為最佳條件提取GYP2。利用MTT法測定絞股藍總皂苷、極性皂苷絞股藍皂苷和弱極性絞股藍皂苷對肝癌細胞的抑制作用,結(jié)果表明絞股藍總皂苷和弱極性絞股藍皂苷

5、對肝癌細胞SMMC7721具有抗癌活性,半抑制率IC50值分別為165.83±14.12μg/mL和113.97±9.26μg/mL,極性絞股藍皂苷沒有抗癌活性;其次利用中壓制備色譜分離純化極性絞股藍皂苷,獲得2個皂苷單體化合物,其化學名分別為2-羥基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖-20(S)-原人參二醇-20-O-β-D-阿拉伯吡喃糖(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷和2-羥基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖(1

6、→2)-β-D-吡喃葡萄糖-20(S)-原人參二醇-20-O-βD-吡喃葡萄糖苷;此外還利用灰綠曲霉、構(gòu)巢曲霉和黑曲霉微生物轉(zhuǎn)化絞股藍皂苷,從灰綠曲霉轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中分離到具有抗癌活性的皂苷單體化合物2α,3β,12β,20(S)-四羥基-24-達瑪烯-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-β-D-吡喃葡萄糖苷,其對肝癌細胞SMMC7721有抑制作用,半抑制率IC50值為91.66μg/mL,對正常肝細胞抑制Chang-liver基本沒有

7、抑制作用。
   為進一步探索柯里拉京抗肝癌作用效果和作用機理。采用裸鼠實體瘤的動物模型,對柯里拉京體內(nèi)抗腫瘤藥理藥效進行評價。結(jié)果表明柯里拉京并沒有明顯抑制腫瘤塊在裸鼠體內(nèi)的生長,柯里拉京能抑制動物體內(nèi)腫瘤的形成及血管生成;解剖裸鼠后,以肝轉(zhuǎn)移灶為統(tǒng)計對象。統(tǒng)計分析顯示,實驗組肝轉(zhuǎn)移灶數(shù)目比對照明顯減少,表明柯里拉京具有抑制癌細胞轉(zhuǎn)移作用。進一步利用ELISA檢測柯里拉京對肝癌細胞SMMC7721用藥后,轉(zhuǎn)化生長因子的表達量T

8、GFβ1與Smad1通路影響,結(jié)果表明柯里拉京通過調(diào)控TGF-β1-Smad1信號通路,從而抑制肝癌細胞轉(zhuǎn)移。此外,流式細胞儀檢測柯里拉京對細胞周期的影響,結(jié)果表明柯里拉京能導致肝癌細胞SMMC7721和Bel7402細胞周期阻滯在G2/M,進一步通過Western-blot雜交檢測細胞周期因子cdc2和cyclin B1的變化,證實柯里拉京通過調(diào)控cyclin B1/Cdc2信號通路,誘導肝癌細胞SMMC7721阻滯在G2/M期。以上

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