rhGH上調(diào)MRP2表達(dá)及促膽紅素轉(zhuǎn)運(yùn)的作用機(jī)制.pdf

1、目的:膽汁淤積是臨床常見病癥.常見于膽胰腫瘤、膽管結(jié)石等外科性膽道梗阻和"淤膽性肝炎"等內(nèi)科性肝內(nèi)郁膽.膽汁淤積可導(dǎo)致復(fù)雜而嚴(yán)重的病理生理改變<'(1)>.對無膽道梗阻(非外科疾病)長時(shí)間重度"淤膽性肝炎"的病人,應(yīng)用常規(guī)的"利膽"、糖皮質(zhì)激素等治療,療效差;阻塞性黃疸病人解除膽道梗阻,黃疸仍難以消退.第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院全軍肝膽外科研究所近兩年在臨床上運(yùn)用生長激素(GH)治療重癥郁膽病人取得了意想不到的效果<'(2、3)>.肝細(xì)胞對膽

2、紅素的排泄是膽紅素代謝的限速步驟,由毛細(xì)膽管面的轉(zhuǎn)運(yùn)子介導(dǎo)的依賴ATP酶逆濃度梯度的過程<'(4)>.轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白MRP2在這一過程中起決定作用,是排泄膽紅素的主要轉(zhuǎn)運(yùn)子<'(5、6)>.GH促進(jìn)膽紅素排泄的作用是否通過上調(diào)MRP2來實(shí)現(xiàn)有待實(shí)驗(yàn)研究.促進(jìn)膽紅素轉(zhuǎn)運(yùn)的分子機(jī)制和信號途徑的研究.可為臨床治療長期重度阻塞性黃疸病人提供理論依據(jù).方法:1、膽道梗阻及再通動(dòng)物模型:大鼠行膽總管結(jié)扎制成膽道梗阻模型,膽總管結(jié)扎術(shù)后14天行結(jié)扎近端膽總

3、管與十二指腸插管架橋膽汁復(fù)流制作成再通模型.2、血清TNF-α和GH的測定:應(yīng)用放射免疫法.3、STAT5活性檢測:應(yīng)用原位雜交檢測技術(shù).4、Mrp2基因表達(dá):RT-PCR檢測其轉(zhuǎn)錄水平,免疫熒光顯微鏡觀察其在肝細(xì)胞膜上定位及蛋白改變情況.結(jié)論:1、膽紅素排泄的主要轉(zhuǎn)運(yùn)子Mrp2在大鼠膽道梗阻后其表達(dá)和在毛細(xì)膽管面上的分布顯著下降.再通術(shù)后Mrp2在大鼠肝細(xì)胞毛細(xì)膽管面的表達(dá)和分布逐漸上升,但恢復(fù)較慢.2、肝細(xì)胞的STAT5在膽道梗阻后

4、表達(dá)顯著下調(diào),是導(dǎo)致膽道梗阻大鼠Mrp2基因表達(dá)下調(diào)的重要原因,同時(shí)炎癥因子TNF-α持續(xù)大量的釋放可間接抑制Mrp2的表達(dá),從而導(dǎo)致和加重膽紅素排泄障礙.3、膽道梗阻時(shí)GH分泌不足,這與膽道梗阻時(shí)營養(yǎng)障礙、炎癥因子TNF-α釋放有關(guān),而GH-GHR功能不足又可導(dǎo)致營養(yǎng)障礙和炎癥因子過量釋放,形成惡性循環(huán),是介導(dǎo)梗阻性黃疸時(shí)病理生理改變的重要因素.4、大鼠在膽道梗阻解除后,但作為膽紅素主要轉(zhuǎn)運(yùn)子Mrp2的表達(dá)恢復(fù)很緩慢.給予rhGH治療