結(jié)核分枝桿菌H37Ra和卡介苗感染小鼠及巨噬細(xì)胞的研究.pdf

1、　　目的：1.了解結(jié)核分枝桿菌H37Ra和卡介苗(BCG)免疫小鼠后細(xì)菌在小鼠體內(nèi)的定植，及誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生的特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答。2.探討H37Ra和BCG誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮(NO)的能力，以及細(xì)菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)生存的能力和破壞巨噬細(xì)胞的能力?！　》椒ǎ?.將H37Ra和BCG分別皮內(nèi)接種BALB/c小鼠，免疫15d、30d及60d后，取稀釋小鼠脾臟和肺臟勻漿接種羅氏培養(yǎng)基，培養(yǎng)18d后計CFU(菌落形成單位)；免疫30d和60d后，

2、取小鼠脾淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng)并用PPD刺激，MTT法檢測脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗，ELISA法檢測培養(yǎng)上清液中IFN-γ的產(chǎn)量。2.H37Ra和BCG分別感染BALB/c小鼠腹腔巨噬細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞株及THP-1細(xì)胞株，24h后取培養(yǎng)上清液，Griess法檢測NO的釋放量；分別于感染后的0、4d及7d用1﹪TritonX-100裂解巨噬細(xì)胞后接種羅氏培養(yǎng)基，培養(yǎng)18d后計CFU；同時于每個時間點，用MTT法檢測巨噬細(xì)胞存活率的變化。