LL-37抑制結(jié)核分枝桿菌感染巨噬細胞炎性因子的分泌研究.pdf

1、目的:
　　探究LL-37在感染結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis,Mtb）的巨噬細胞(macrophage,Mφ)中對炎性因子分泌的影響及其抗炎作用。
　　方法：
　?。?）使用豆蔻酰佛波醇乙酯（PMA）將THP-1細胞誘導(dǎo)分化為具有吞噬能力的巨噬細胞（Mφ），用Mtb感染Mφ，建立細胞模型，用不同濃度的LL-37處理感染Mtb的巨噬細胞，并設(shè)置對照組。
　?。?）實驗分組：①正

2、常對照組: THP-1+normal saline(NS);② Mtb組:THP-1+Mtb;③ Mtb+5μg/ml LL-37組: THP-1+Mtb+5μg/ml LL-37;④Mtb+10μg/ml LL-37組: THP-1+Mtb+10μg/ml LL-37;⑤ Mtb+20μg/ml LL-37組: THP-1+Mtb+20μg/ml LL-37。
　?。?）不同時間點收獲細胞，提取RNA，用(Real-time P

3、CR,RT-PCR)法檢測促炎因子IL-12p40、TNF-α及抗炎因子IL-4、IL-10 mRNA的表達；用ELISA法測定以上各組細胞培養(yǎng)上清中細胞因子IL-12p40、TNF-α、IL-4、IL-10的分泌量。
　　結(jié)果：
　　與正常對照組相比，Mtb感染組各時間段IL-12p40、TNF-α、IL-4及IL-10的mRNA表達上調(diào)，并且其分泌量顯著增加（P＜0.05）；LL-37刺激組與Mtb組相比，各時間段外源性