N-甲基小檗胺對大鼠腸系膜阻力血管平滑肌細胞鈣激活鉀電流的作用.pdf

1、高血壓是危害人類健康的重要疾病,其發(fā)病因素是多方面的,然而,由于高血壓的主要表現(xiàn)是外周阻力血管張力持續(xù)升高,同時血管對加壓物質(zhì)的反應(yīng)性增高,因此,高血壓發(fā)病的血管機制受到高度重視.血管張力持續(xù)升高是血管舒縮活動異常所致,血管舒縮活動則取決于平滑肌的收縮與舒張狀態(tài).細胞膜離子通道的正常活動是血管平滑肌興奮舒縮過程的關(guān)鍵,也是維持細胞的興奮性與膜穩(wěn)定性的保證.其中,鈣通道與鉀通道的作用至為重要.鉀通道通過影響細胞膜電位引起電壓依賴性鈣通道的

2、開放與關(guān)閉,改變胞內(nèi)游離Ca<'2+>濃度進而影響血管的舒縮狀態(tài).近年來應(yīng)用膜片鉗技術(shù)發(fā)現(xiàn)血管平滑肌細胞膜上至少存在四種不同類型的鉀離子通道,鈣激活鉀(K<,Ca>)通道在調(diào)節(jié)血管的舒縮中起著重要作用.實驗方法:1.大鼠腸系膜動脈平滑肌細胞的制備.Wistar大鼠,體重(300±20)g,由中國醫(yī)科大學實驗動物部提供,♀♂兼用.10﹪水合氯醛4ml/Kg ip.麻醉,開腹分離腸系膜動脈A<,4>~A<,5>分支并迅速移至冰冷的含鈣生理鹽

3、溶液中,經(jīng)修飾后用小剪子將動脈剪碎,用二步酶解法分離出單個血管平滑肌細胞,當細胞數(shù)量最多、質(zhì)量最好時,收集細胞.將細胞懸液保存于4℃冰箱中,8小時內(nèi)使用.2.I<,Kca>的電生理記錄.選取胞膜光滑完整,胞漿均勻,長梭形舒展的細胞進行實驗.全細胞狀態(tài)形成后,用pCLAMP5.5.1軟件程序發(fā)放刺激并收集記錄信號.采用保持電位為-60mV,刺激電位為-60mV~+60mV,步階脈沖10mV,波寬500ms,刺激間隔3s的方波鉗制方案進行刺