α-干擾素聯(lián)合環(huán)孢霉素A對(duì)T24-ADM細(xì)胞耐藥逆轉(zhuǎn)的研究.pdf

1、目的：檢測T24/ADM細(xì)胞的多藥耐藥性。確定環(huán)孢霉素A對(duì)T24/ADM細(xì)胞的非毒性劑量逆轉(zhuǎn)范圍。探討單獨(dú)逆轉(zhuǎn)組（α-干擾素或環(huán)孢霉素A）和聯(lián)合逆轉(zhuǎn)組（α-干擾素和環(huán)孢霉素A）對(duì)T24/ADM細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)作用。
　　 方法：復(fù)蘇培養(yǎng)T24、T24/ADM細(xì)胞，MTT法檢測其耐藥性，流式細(xì)胞術(shù)檢測T24、T24/ADM細(xì)胞P-gp的表達(dá)率。MTT法檢測不同濃度環(huán)孢霉素A對(duì)T24/ADM細(xì)胞的毒性作用。分別以不同濃度梯度環(huán)孢霉素A(0

2、.1、1.0、2.0、4.0、8．O、16.0μg/ml)加入到T24/ADM測定其細(xì)胞抑制作用并確定其非毒性濃度。MTT法測定單獨(dú)逆轉(zhuǎn)組（環(huán)孢霉素A或干擾素-α）和聯(lián)合逆轉(zhuǎn)組（環(huán)孢霉素A和干擾素-α）對(duì)T24/ADM細(xì)胞的抑制率，流式細(xì)胞術(shù)檢測T24/ADM細(xì)胞P-gp的表達(dá)率。
　　 結(jié)果：1．檢測T24/ADM耐藥性。實(shí)驗(yàn)組阿霉素對(duì)T24細(xì)胞的IC5=1.84μg/ml，對(duì)T24/ADM細(xì)胞IC50=7.25μg/ml，R

3、I=3.94，析因方差分析各濃度間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 2．環(huán)孢霉素A濃度為4．Oμg/ml時(shí)，對(duì)T24/ADM細(xì)胞生長抑制率為(4.27±0.71)％，環(huán)孢霉素A濃度≤4.0ug/ml對(duì)T24/ADM細(xì)胞無明顯細(xì)胞毒作用（細(xì)胞生長率≥95%時(shí)的濃度作為非細(xì)胞毒性劑量），因此把環(huán)孢霉素A濃度≤4．Oμg/ml作為逆轉(zhuǎn)非細(xì)胞毒性劑量范圍。
　　 3．測定單獨(dú)逆轉(zhuǎn)組、聯(lián)合逆轉(zhuǎn)組對(duì)T24/ADM細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)

4、作用。當(dāng)CsA濃度為1.0μg/ml時(shí)，其對(duì)T24/ADM細(xì)胞的抑制率(18.8±0.027)%(P＜O.01)。當(dāng)TNF-α濃度為4.0×106u/l，其對(duì)T24/ADM細(xì)胞的抑制率(37.8±0.025)%(P＜O.01)。當(dāng)濃度為2．O×106U/L的INF-α聯(lián)合濃度為0.1μg/ml的CsA時(shí)其對(duì)T24/ADM細(xì)胞的抑制率(38.4±0.025)%(P＜O.01)，就與濃度為2.0μg/ml的CsA單獨(dú)逆轉(zhuǎn)效果相當(dāng)。CsA聯(lián)合

5、TNF-α?xí)r比單獨(dú)使用一種有更好的效果，且呈明顯劑量效應(yīng)關(guān)系，二者聯(lián)合應(yīng)用，呈協(xié)同效應(yīng)。
　　 4．α-干擾素和環(huán)孢霉素A對(duì)T24/ADM細(xì)胞P-gp表達(dá)率的影響。CsA實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，對(duì)T24/ADM細(xì)胞P-gp表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，CsA不影響T24/ADM細(xì)胞P-gp的表達(dá)。TNF-α實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，對(duì)T24/ADM細(xì)胞P-gp表達(dá)率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，TNF-α也不影響T24/AD

6、M細(xì)胞P-gp的表達(dá)。當(dāng)CsA+TNF-α聯(lián)合實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比，對(duì)T24/ADM細(xì)胞P-gp表達(dá)率差異也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，兩者聯(lián)合也不影響T24/ADM細(xì)胞P-gp的表達(dá)率。
　　 結(jié)論：1．CsA與TNF-α均可不同程度逆轉(zhuǎn)T24/ADM細(xì)胞的耐藥性。
　　 2．CsA與TNF-α聯(lián)合使用逆轉(zhuǎn)效果好于單獨(dú)使用，兩者呈協(xié)同作用。
　　 3．CsA和TNF-α無論是單獨(dú)還是聯(lián)合均不影響T24/ADM細(xì)