15d-PGJ-,2-對(duì)TRPA1離子通道的作用以及對(duì)TRPA1介導(dǎo)的疼痛行為的抑制.pdf

1、瞬時(shí)受體電位離子通道(Transient receptor potential ion channels,TRPs)是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)存在于細(xì)胞膜或胞內(nèi)細(xì)胞器膜上的非選擇性陽(yáng)離子通道。其中TRPA1亞型被認(rèn)為介導(dǎo)生物對(duì)外界低溫、刺激性化學(xué)物質(zhì)和機(jī)械刺激的感受，TRPA1還參與炎癥性和神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)病機(jī)制。
　　 15-去氧-△-(12,14)前列腺素J2(15d-PGJ2)，是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的在組織損傷、炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激中釋放的一種

2、內(nèi)源性物質(zhì)。我們與其他研究小組以前的研究發(fā)現(xiàn)15d-PGJ2能夠與TRPA1蛋白N-末端半胱氨酸共價(jià)結(jié)合而激動(dòng)TRPA1離子通道，并引起TRPA1依賴性的急性疼痛行為。然而，最近的研究表明，在急性痛、炎癥性疼痛和神經(jīng)病理性疼痛模型中，15d-PGJ2還具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。
　　 本研究假設(shè)15d-PGJ2的鎮(zhèn)痛作用是由于其對(duì)外周感覺(jué)神經(jīng)元的激動(dòng)以及隨后的脫敏作用。為了證實(shí)該假設(shè)，本研究使用Fura-2AM鈣離子成像技術(shù)首先比較了

3、15d-PGJ2和AITC對(duì)TRPA1離子通道的激動(dòng)作用，以及誘發(fā)的小鼠急性疼痛行為。隨后，我們測(cè)試了不同濃度的15d-PGJ2和AITC預(yù)處理對(duì)TRPA1表達(dá)陽(yáng)性的背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞的脫敏作用，以及足底預(yù)先注射15d-PGJ2或AITC對(duì)小鼠急性疼痛反應(yīng)的作用。最后觀察了15d-PGJ2對(duì)炎癥性疼痛模型的鎮(zhèn)痛作用，并使用TRPA1基因敲除小鼠，探討了TRPA1離子通道在15d-PGJ2鎮(zhèn)痛機(jī)制中的作用。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　

4、 1.15d-PGJ2和AITC劑量依賴性的激動(dòng)TRPA1離子通道，引起小鼠的急性疼痛反應(yīng)。
　　 2.與同濃度AITC相比，25和50μM低濃度15d-PGJ2預(yù)處理能顯著降低AITC反應(yīng)陽(yáng)性的DRG神經(jīng)元數(shù)目和反應(yīng)強(qiáng)度。100和200μM高濃度15d-PGJ2和AITC都能顯著降低DRG神經(jīng)元對(duì)AIIC的反應(yīng)性，但15d-PGJ2對(duì)辣椒素引起的神經(jīng)元激動(dòng)沒(méi)有抑制作用。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)，足底預(yù)先注射15mM15d-PGJ2能

5、顯著降低隨后15d-PGJ2或AITC注射引起的急性疼痛，但15d-PGJ2對(duì)辣椒素引起的急性疼痛沒(méi)有抑制作用。任何濃度的AITC對(duì)小鼠急性疼痛行為都沒(méi)有抑制作用。
　　 3.足底注射15d-PGJ2能減輕CFA注射造成的炎癥性機(jī)械痛敏感，這種鎮(zhèn)痛作用在TRPA1基因敲除的小鼠中完全消失。
　　 綜上所述，本研究證實(shí)TRPA1激動(dòng)劑15d-PGJ2能激動(dòng)周圍感覺(jué)神經(jīng)元上的TRPA1離子通道，隨后長(zhǎng)時(shí)間脫敏離子通道，并產(chǎn)生