15d-PGJ-,2-對TRPA1離子通道的作用以及對TRPA1介導(dǎo)的疼痛行為的抑制.pdf

1、瞬時受體電位離子通道(Transient receptor potential ion channels,TRPs)是近年來發(fā)現(xiàn)存在于細(xì)胞膜或胞內(nèi)細(xì)胞器膜上的非選擇性陽離子通道。其中TRPA1亞型被認(rèn)為介導(dǎo)生物對外界低溫、刺激性化學(xué)物質(zhì)和機械刺激的感受，TRPA1還參與炎癥性和神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)病機制。
　　 15-去氧-△-(12,14)前列腺素J2(15d-PGJ2)，是近年來發(fā)現(xiàn)的在組織損傷、炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激中釋放的一種

2、內(nèi)源性物質(zhì)。我們與其他研究小組以前的研究發(fā)現(xiàn)15d-PGJ2能夠與TRPA1蛋白N-末端半胱氨酸共價結(jié)合而激動TRPA1離子通道，并引起TRPA1依賴性的急性疼痛行為。然而，最近的研究表明，在急性痛、炎癥性疼痛和神經(jīng)病理性疼痛模型中，15d-PGJ2還具有顯著的鎮(zhèn)痛作用。
　　 本研究假設(shè)15d-PGJ2的鎮(zhèn)痛作用是由于其對外周感覺神經(jīng)元的激動以及隨后的脫敏作用。為了證實該假設(shè)，本研究使用Fura-2AM鈣離子成像技術(shù)首先比較了

3、15d-PGJ2和AITC對TRPA1離子通道的激動作用，以及誘發(fā)的小鼠急性疼痛行為。隨后，我們測試了不同濃度的15d-PGJ2和AITC預(yù)處理對TRPA1表達陽性的背根神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞的脫敏作用，以及足底預(yù)先注射15d-PGJ2或AITC對小鼠急性疼痛反應(yīng)的作用。最后觀察了15d-PGJ2對炎癥性疼痛模型的鎮(zhèn)痛作用，并使用TRPA1基因敲除小鼠，探討了TRPA1離子通道在15d-PGJ2鎮(zhèn)痛機制中的作用。主要實驗結(jié)果如下：
　　

4、 1.15d-PGJ2和AITC劑量依賴性的激動TRPA1離子通道，引起小鼠的急性疼痛反應(yīng)。
　　 2.與同濃度AITC相比，25和50μM低濃度15d-PGJ2預(yù)處理能顯著降低AITC反應(yīng)陽性的DRG神經(jīng)元數(shù)目和反應(yīng)強度。100和200μM高濃度15d-PGJ2和AITC都能顯著降低DRG神經(jīng)元對AIIC的反應(yīng)性，但15d-PGJ2對辣椒素引起的神經(jīng)元激動沒有抑制作用。行為學(xué)實驗也發(fā)現(xiàn)，足底預(yù)先注射15mM15d-PGJ2能

5、顯著降低隨后15d-PGJ2或AITC注射引起的急性疼痛，但15d-PGJ2對辣椒素引起的急性疼痛沒有抑制作用。任何濃度的AITC對小鼠急性疼痛行為都沒有抑制作用。
　　 3.足底注射15d-PGJ2能減輕CFA注射造成的炎癥性機械痛敏感，這種鎮(zhèn)痛作用在TRPA1基因敲除的小鼠中完全消失。
　　 綜上所述，本研究證實TRPA1激動劑15d-PGJ2能激動周圍感覺神經(jīng)元上的TRPA1離子通道，隨后長時間脫敏離子通道，并產(chǎn)生