脂肪源干細(xì)胞在PLCL纖維表面粘附、增殖及向平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究.pdf

1、目的：應(yīng)用脂肪源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells，ADSCS)與聚乳酸-己內(nèi)酯(poly(lactide/ε-caprolactone)，PLCL)纖維進(jìn)行復(fù)合培養(yǎng)，觀察ADSCS在PLCL材料上的生物學(xué)表現(xiàn)，研究PLCL材料對ADSCS的增殖、粘附及向平滑肌細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響，評估PLCL材料的生物相容性，為尿道損傷的修復(fù)尋找合適的支架材料。
　　 方法：用靜電紡紗技術(shù)合成PLCL，應(yīng)用I型膠原酶酶

2、解法分離出附睪附近脂肪源干細(xì)胞，選用傳代細(xì)胞差速貼壁培養(yǎng)后，對提取細(xì)胞進(jìn)行純化，采用鼠源性兔CD105分子的單克隆抗體運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行脂肪干細(xì)胞鑒定，將純化、鑒定后的第五代ADSCS與PLCL材料結(jié)合培養(yǎng)，用MTT法檢測材料對細(xì)胞增殖的影響，并計算細(xì)胞在材料上的粘附率，在PLCL材料上對脂肪干細(xì)胞進(jìn)行成平滑肌誘導(dǎo)分化，運(yùn)用RT-PCR法對誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)行平滑肌早期標(biāo)志物α-Actin基因的檢測。
　　 結(jié)果：ADSCS與PLCL復(fù)

3、合培養(yǎng)后，細(xì)胞生長良好；運(yùn)用MTT法測得實驗組(有PLCL材料)與對照組(無PLCL材料)吸光度值存在顯著性差異，實驗組吸光度值明顯高于對照組；用細(xì)胞計數(shù)器測得有PLCL材料組較無PLCL材料組細(xì)胞粘附更顯著；在PLCL表面誘導(dǎo)ADSCS向平滑肌細(xì)胞分化后，運(yùn)用RT-PCR技術(shù)，實驗組α-Actin基因陽性條帶亮度稍強(qiáng)于對照組。
　　 結(jié)論：PLCL纖維材料可促進(jìn)ADSCS的粘附及增殖，對其向平滑肌細(xì)胞方向的分化過程影響不大，P