用于畢赤酵母組成型表達(dá)的白斑綜合征病毒（WSSV）VAP1基因的優(yōu)化、克隆及大規(guī)模簡易發(fā)酵技術(shù)初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、對蝦白斑綜合征病毒(WSSV)是危害全球?qū)ξr養(yǎng)殖業(yè)的主要病原微生物之一。自1992年以來，已經(jīng)對該病毒及對蝦白斑綜合征進(jìn)行了大量的研究。目前已經(jīng)得到WSSV基因組全序列，從而為病毒功能基因的研究以及病毒侵染機(jī)理的研究奠定了基礎(chǔ)。VAP1是定位在WSSV囊膜上的一個蛋白，由281個氨基酸組成，沒有糖基化。通過試驗論證，目前已經(jīng)可以確認(rèn)該蛋白是病毒侵入對蝦細(xì)胞的一個重要的黏附蛋白。 本研究對VAP1基因進(jìn)行了分析和設(shè)計改造，旨在通過

2、基因的優(yōu)化提高其在畢赤酵母中的表達(dá)量。改造的內(nèi)容主要包括以下幾方面： 1.選擇畢赤酵母偏愛密碼子，使得VAP1基因的密碼子符合畢赤酵母在表達(dá)蛋白時對密碼子的偏愛。 2.堿基含量調(diào)整，避免A+T富集。3酶切位點分析及密碼子整。4酶的星號活性分析及密碼子調(diào)整。5內(nèi)含子分析及密碼子調(diào)整。 3.在基因改造的基礎(chǔ)之上，對改造后的基因VAP1part進(jìn)行全基因合成，并將合成的基因克隆至酵母表達(dá)載體pGAPZαA，之后導(dǎo)入大腸

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