成肌因子介導microRNA表達的力學信號調控.pdf

1、南方醫(yī)科大學2011級碩士學位論文成肌因子介導microRNA表達的力學信號調控一o11‘‘‘1111‘■’StudyonmechanicalsignalsregulationinmyogenlcfactormediatedmicroRNAexpression課題來源：國家自然科學基金(31100700)學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院張馬輝邱小忠教授人體解剖與組織胚胎學學術型碩士基礎醫(yī)學院2014年3月20日廣州中文

2、摘要果蠅、Hela細胞等許多真核模式生物和細胞中找到了數百種相似的小分子RNA，并將其稱為miRNA(micmRNA)。MicroRNA是小分子的進化上高度保守的非編碼RNAs，其由RNA聚合酶II轉錄作為編碼一個或多個miRNAs的長前體miRNAs。大部分miRNA作為獨立的轉錄本被轉錄，但大約有1／3嵌在蛋白編碼基因的內含子中，被前信使RNAs剪接。PrimiRNAs在胞核中經蛋白質Drosha和DGCR8剪切，產生一個60～70

3、bp的具有發(fā)夾樣結構的RNA，稱為前體miRNA(precursormiRNA，premiRNA)，Exprotin5將其由胞核運至胞質，在胞質中Dicer酶將其剪切成為2125bp的雙鏈RNA。這個雙鏈RNA由Dicer酶上釋放，在解螺旋酶作用下分離，其中一條單鏈與RNA誘導沉默復合體(RNAinducedsilencingcomplex，msc)結合，與目標mRNAs互補，發(fā)揮miRNA功能，另一條立即被降解。miRNAs通過與靶m

4、RNA3qJTRs序列特異性互補，調節(jié)基因表達，導致翻譯抑制或使mRNA失去穩(wěn)定性。對靶mRNA結合特異性互補的主要決定因素是由miRNA5’末端WatsonCrick28個堿基配對核苷酸決定，稱為“種子序列”。然而，這個區(qū)域外的核苷酸作為mRNA3UTR序列環(huán)繞區(qū)域的二級結構，同樣影響mRNA抑制，且其miRNA的靶向定位與開放讀框有關。microRNA與其靶基因的互補程度決定其作用模式：l、microRNA與靶mRNA完全互補結合，

5、切割靶mRNA。2、microRNA與靶mRNA不完全互補結合，抑制靶蛋白翻譯而不影響mRNA穩(wěn)定性。3、同時具有以上兩種作用模式。肌組織特異表達的三種miRs：即miR1，miR133和miR206，它們被證實主要作用在肌原細胞或成肌細胞增殖、分化為成熟肌管的過程中。體外組織培養(yǎng)細胞可模擬體內肌肉增殖分化過程。使用C2C12細胞模型系統(tǒng)，過表達和敲除實驗已應用于研究肌肉miRNA的功能。在C2C12成肌細胞中過表達的miR1和miR2