硼毒下柑橘根葉蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、硼（B）是植物生長發(fā)育過程中所必需的微量營養(yǎng)元素之一，與植物的核酸代謝、碳水化合物合成和運輸、細胞壁合成、生物膜的完整性和功能等有關(guān)。作物硼毒害雖不如缺硼普遍，但硼對植物的適用量和致害量之間的差距很小，世界上有不少地區(qū)存在因施肥不當或其它原因而導(dǎo)致作物硼毒害現(xiàn)象。柑橘為亞熱帶常綠果樹，我國柑橘主產(chǎn)區(qū)時常出現(xiàn)不同程度的硼中毒現(xiàn)象。本研究以耐硼毒性不同的雪柑和酸柚為試驗材料，采用雙向電泳技術(shù)研究了硼毒下柑橘根葉蛋白質(zhì)組的變化，旨在從蛋白質(zhì)組

2、學水平揭示柑橘耐硼毒的分子機制，為柑橘高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)栽培提供科學依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　1、通過對蛋白樣品的制備方法、蛋白上樣量、凝膠染色方法等參數(shù)進行了優(yōu)化，建立了適用于柑橘蛋白質(zhì)組研究的雙向電泳技術(shù)體系，經(jīng)膠體考染法染色后可獲得背景清晰、重復(fù)性好、蛋白點分辨率較高的雙向電泳圖譜，經(jīng)PDQuest軟件檢測有800多個蛋白點。
　　2．運用2-DE技術(shù)對10μM（對照）和400μM（硼毒）硼處理的酸柚和雪柑實生苗根葉蛋白質(zhì)進

3、行了分離，并利用 PDQuest凝膠圖像分析軟件確定了224個硼毒害誘導(dǎo)的差異表達蛋白，其中138個上調(diào)，81個下調(diào)。
　　3.對224個差異蛋白點進行質(zhì)譜分析（MALDI-TOF/TOF-MS），成功鑒定了206個蛋白點，這些差異蛋白主要涉及（1）抗氧化與解毒代謝、（2）逆境脅迫蛋白、（3）細胞壁與骨架代謝、（4）碳水化合物及能量代謝、（5）蛋白質(zhì)代謝、（6）核酸代謝、（7）細胞轉(zhuǎn)運、（8）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、（9）脂質(zhì)代謝和（10）功能

4、未知蛋白。
　　4.在根尖，酸柚和雪柑在硼毒脅迫時都能誘導(dǎo)相關(guān)抗氧化酶上調(diào)表達以抵御硼毒害造成的氧化脅迫；此外，相關(guān)抗性蛋白（如熱激蛋白、鋅指蛋白及拉鏈蛋白）、蛋白酶體和膜轉(zhuǎn)運蛋白V-ATPase的上調(diào)，以及延伸因子和翻譯起始因子的差異表達等可能都有利于柑橘根的耐硼毒性；不過，硼毒對酸柚和雪柑根中參與蛋白、核酸等代謝的相關(guān)蛋白的影響并不相同。
　　5．雪柑葉片的耐硼毒性明顯比酸柚高，可能與硼毒下雪柑葉片核酮糖1,5-二磷酸羧