農(nóng)藥對(duì)家蠶的慢性毒性試驗(yàn)方法和吡蟲啉等對(duì)家蠶的慢性毒性研究.pdf

1、家蠶(Bombyx mori L.)對(duì)農(nóng)藥十分敏感，桑園又和農(nóng)田連在一起，農(nóng)藥漂移污染桑葉后極易引起家蠶中毒。本研究擬建立農(nóng)藥對(duì)家蠶的慢性毒性評(píng)價(jià)方法，選擇吡蟲啉和樂(lè)果為代表性藥劑，探明農(nóng)藥非致死劑量對(duì)家蠶的生物學(xué)參數(shù)、經(jīng)濟(jì)學(xué)指標(biāo)的影響，評(píng)價(jià)其對(duì)家蠶的慢性毒性大??；并檢測(cè)家蠶解毒酶活性的變化，探討其作為慢性毒性評(píng)價(jià)指標(biāo)的可行性。本研究對(duì)完善我國(guó)農(nóng)藥環(huán)境毒性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)體系，指導(dǎo)桑樹病蟲害防治和安全養(yǎng)蠶均有較大意義。
　　 通過(guò)采用食

2、下毒葉法、浸葉法和定量噴霧法3種方法分別測(cè)定了5種代表性藥劑對(duì)家蠶的急性毒性。結(jié)果表明：3種方法所測(cè)5種藥劑對(duì)家蠶96h的LC50值相比，均以定量噴霧法的為最大，食下毒葉法和浸葉法的LC50值為定量噴霧法的1/2左右，表明后兩種方法測(cè)得的毒性虛高了1倍左右。定量噴霧法定量精準(zhǔn)，適合用于家蠶慢性毒性試驗(yàn)。
　　 研究建立了農(nóng)藥對(duì)家蠶的慢性毒性試驗(yàn)方法。以樂(lè)果作為標(biāo)準(zhǔn)藥劑，采用定量噴霧法，在實(shí)驗(yàn)室用potter噴霧裝置將藥液定量噴于

3、桑葉的背面，以初始噴霧體積為2mL或4mL(根據(jù)桑葉質(zhì)量決定)、噴霧壓力7psi、沉降時(shí)間為20s作為標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)。晾干后將每片葉子的葉柄插入灌滿瓊脂的離心管(1.5mL)中后轉(zhuǎn)入通風(fēng)式昆蟲毒性試驗(yàn)培養(yǎng)裝置。針對(duì)家蠶的生長(zhǎng)發(fā)育特點(diǎn)，設(shè)計(jì)2齡蠶和5齡蠶兩個(gè)階段進(jìn)行給藥處理。將樂(lè)果稀釋5～6個(gè)系列濃度，供試家蠶為2齡起蠶或5齡起蠶，每處理10頭蠶，重復(fù)3次。于上簇后第8d測(cè)經(jīng)濟(jì)學(xué)指標(biāo)。結(jié)果表明：用非致死劑量樂(lè)果處理家蠶幼蟲，高濃度處理較低濃度處

4、理對(duì)家蠶生物學(xué)參數(shù)、經(jīng)濟(jì)學(xué)指標(biāo)影響大。其中樂(lè)果最高濃度40.0mg/kg桑葉與對(duì)照相比，在2齡階段給藥，其2齡、3齡、4齡、5齡發(fā)育歷期分別延長(zhǎng)1.92％、3.81％、3.93％、4.22％，2眠、3眠、4眠、熟蠶質(zhì)量分別降低7.57％、8.10％、3.64％、5.32％，全繭量、繭層量分別降低13.7％、10.9％；在5齡階段給藥，5齡發(fā)育歷期延長(zhǎng)5.79％，熟蠶質(zhì)量降低7.88％，全繭量、繭層量分別降低16.2％、17.3％；5齡給

5、藥較2齡給藥全繭量和繭層量分別降低3.05％和1.80％，表明5齡給藥對(duì)經(jīng)濟(jì)學(xué)指標(biāo)的影響更大。以5齡期家蠶為試驗(yàn)蟲態(tài)建立慢性毒性試驗(yàn)方法，其試驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確可靠。樂(lè)果對(duì)家蠶慢性毒性的最低可觀察效應(yīng)劑量為16.0mg/kg桑葉，對(duì)2齡家蠶96小時(shí)LC50值為824mg/kg桑味，慢性毒性適合的處理劑量大約是LC50值的1/51.5。
　　 利用建立的農(nóng)藥對(duì)家蠶慢性毒性試驗(yàn)方法測(cè)定了吡蟲啉對(duì)家蠶的慢性毒性。結(jié)果表明：非致死劑量吡蟲啉對(duì)

6、家蠶的生物學(xué)參數(shù)、經(jīng)濟(jì)學(xué)指標(biāo)的影響隨藥劑濃度的增高而變大。吡蟲啉最高濃度0.0500mg/kg桑葉與對(duì)照相比，在2齡階段給藥，2齡、3齡、4齡、5齡發(fā)育歷期分別延長(zhǎng)1.68％、5.36％、6.01％、7.41％，2眠、3眠、4眠、熟蠶質(zhì)量分別減輕8.92％、10.5％、5.58％、7.83％，全繭量、繭層量分別減輕14.8％、16.8％；5齡階段給藥，5齡發(fā)育歷期延長(zhǎng)9.63％，熟蠶質(zhì)量降低11.3％，全繭量、繭層量分別減輕16.4％、

7、19.8％；5齡給藥較2齡給藥全繭量和繭層量分別降低9.99％和3.70％，說(shuō)明5齡給藥對(duì)經(jīng)濟(jì)學(xué)指標(biāo)的影響更大，5齡給藥與2齡給藥相比更為敏感。吡蟲啉對(duì)家蠶慢性毒性的最低可觀察效應(yīng)劑量為0.0200mg/kg桑葉，對(duì)2齡家蠶96小時(shí)LC50值為0.905mg/kg桑葉，慢性毒性適合的處理劑量大約是LC50值的1/45.5。
　　 測(cè)定了不同齡期家蠶解毒酶活性。研究表明，家蠶羧酸酯酶比活力隨齡期增大而升高；家蠶谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶

8、比活力隨齡期增大而降低。分別用非致死劑量的吡蟲啉處理幼蠶，短期內(nèi)羧酸酯酶比活力均上升，且高濃度處理組上升幅度最大，但與對(duì)照相比無(wú)顯著性差異。對(duì)于谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶比活力，2齡階段給藥，濃度較高處理0.0200mg/kg曩葉與對(duì)照相比有顯著性差異，但隨著齡期的增加，顯著性差異消失；5齡階段給藥，濃度為0.0200mg/kg桑葉的處理與對(duì)照相比，其比活力有顯著性差異，2處理濃度之間無(wú)顯著性差異。因此，解毒酶的變化規(guī)律尚不能作為檢測(cè)家蠶慢性