stat3對cps感染細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響-檢驗專業(yè)畢業(yè)論文ppt

1、STAT3對Cps感染細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響,,,本科畢業(yè)論文開題報告,,目錄,,,2,2,4,5,5,,4,,5,,可行性和創(chuàng)新性分析,,選題背景及研究意義,,,一、研究背景,1.衣原體（Chlamydiae）為革蘭氏陰性病原體，是一類能通過細菌濾器、在細胞內(nèi)寄生、具有獨特發(fā)育周期的原核細胞型微生物；2.衣原體的持續(xù)性感染是引起宿主慢性炎癥反應(yīng)和組織纖維化重要原因；3. 衣原體持續(xù)性感染的重要機制之一是抑制宿主細胞凋亡。,,選

2、題背景及研究意義,,,衣原體抗細胞凋亡與細胞內(nèi)信號通路關(guān)系的研究,1.肺炎嗜衣原體（Cpn）持續(xù)性感染的上皮細胞中凋亡抑制 蛋白（IAP）通過細胞核因子NF-KB途徑發(fā)揮抗凋亡作用； 2.沙眼衣原體（Ct）可通過激活STAT1 信號通路誘導STAT信號通路及其負調(diào)控因子細胞因子信號轉(zhuǎn)導抑制子（SOCS1） 蛋白表達并抑制宿主細胞產(chǎn)生NO，抑制細胞凋亡，造成持續(xù)性感染。,,選題背景及研究意義,

3、,,二、研究意義,,本研究基于衣原體感染能引起宿主持續(xù)性感染，而抗宿主細胞凋亡是持續(xù)性感染的重要機制之一，但衣原體具有多種抗凋亡機制，研究STAT3對鸚鵡熱嗜衣原體（Cps）感染細胞的相關(guān)凋亡機制研究，為進一步揭示衣原體的致病機制奠定基礎(chǔ)。,,研究內(nèi)容及技術(shù)路線,,,一、研究內(nèi)容,,1.建立Cps感染細胞模型； 2.流式細胞術(shù)和Hoechst33258熒光染色檢測各組細胞 3.Western blot法檢測

4、相關(guān)蛋白表達情況。,凋亡情況；,研究內(nèi)容及技術(shù)路線,,STAT3信號通路,,,研究內(nèi)容及技術(shù)路線,,,活化的STAT3,,Bax/Bcl-2家族,Cleaved-caspase3,Cleaved-caspase9,STAT3磷酸化,,細胞受到刺激,,,Caspase9,,,Caspase3,Caspase7,Cleaved-caspase7,抑制PARP活化,,,某些化學片段C表達改變,,,抑制細胞凋亡,,選題背景及研究意義,,,二、方

5、案路線,Hela229細胞鋪板,CpsHela229細胞感染模型建立,加入AG490阻斷、ST進行誘導,Hela,ST,AG490,Cps,Cps+AG490,Cps+ST,Cps+ST+AG490,流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況,WB法檢測相關(guān)凋亡蛋白,實驗結(jié)果分析,Hoechst33258熒光染色法檢測細胞核形態(tài),,課題研究的重點和難點,,,一、研究重點,Western blot法檢測Cps感染細胞凋亡相關(guān)蛋白的表達水平變化。,二、

6、研究難點,1.Western blot檢測條件的優(yōu)化； 2.Cps細胞感染模型的構(gòu)建； 3.Hoechst33258熒光染色測凋亡中，染色時間及工作 溶液濃度的控制。,,研究進度安排,,,進度安排,1.已知有多條信號途徑參與衣原體抑制宿主細胞凋亡，并且已經(jīng)證實STAT3信號通路可抑制某些腫瘤細胞凋亡，但STAT3信號通路與衣原體的抗凋亡作用關(guān)系未見報道。本實驗在綜合分析文獻資料的基礎(chǔ)上提出這一假設(shè)，具有較強的