沙門菌屬檢驗(yàn)

1、文件編號：生效日期：20111101文件版本：第一版元謀縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室沙門菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件頁碼：12編寫：常曉林20110910審核：文佳瓊20111101批準(zhǔn)：文佳瓊201111011概述沙門菌屬是一類分布廣泛、血清型較多、抗原復(fù)雜的腸道病原菌，分為6個亞屬、2200種以上的血清型。傷寒沙門菌屬亞屬I，多價(jià)O抗血清D群，是臨床上最為重要的沙門菌。2.標(biāo)本類型糞便、血液等標(biāo)本。3.鑒定3.1形態(tài)與染色革蘭陰性桿菌，菌體

2、細(xì)長。有周鞭毛。3.2培養(yǎng)特性在麥康凱瓊脂平板上35℃培養(yǎng)18～24小時(shí)，形成無色、透明的菌落。SS瓊脂平板上呈無色、透明菌落，但大部分菌落中央呈黑色（產(chǎn)H2S）。3.3生化反應(yīng)氧化酶試驗(yàn)陰性，發(fā)酵葡萄糖，不發(fā)酵乳糖，三糖鐵瓊脂（TSI）為KA，動力、賴氨酸脫羧酶和硝酸鹽還原試驗(yàn)陽性，大多數(shù)菌株H2S試驗(yàn)陽性，IMViC或。3.4鑒別要點(diǎn)3.4.1本菌屬特征選擇SS平板上無色透明、半透明或中心黑色的菌落，TSI為KA，H2S陽性或陰性，

3、動力試驗(yàn)陽性，，IMViC或，氧化酶、脲酶試驗(yàn)陰性。符合上述特征者，可通過血清凝集試驗(yàn)作出診斷。3.4.2與志賀菌屬的鑒別少數(shù)傷寒沙門菌在TSI上H2S陰性，動力不明顯，易與志賀菌屬相混淆，可用血清凝集試驗(yàn)相鑒別。3.5操作步驟3.5.1觀察菌落特征，挑取可疑菌落，做TSI試驗(yàn)。參見《三糖鐵試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》。3.5.2血清學(xué)鑒定參見《沙門菌血清學(xué)檢測標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》。3.5.3鑒定從SS瓊脂平板上挑取純菌落，用微生物鑒定儀或傳統(tǒng)生化反應(yīng)

4、進(jìn)行細(xì)菌鑒定。4.藥敏參見《藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》。5.質(zhì)量控制參見《質(zhì)量管理程序》。6.檢驗(yàn)結(jié)果解釋與分析沙門菌屬的鑒定應(yīng)依賴于傳統(tǒng)或商品化系統(tǒng)生化反應(yīng)和血清學(xué)兩種方法。若生化反應(yīng)符合沙門菌，但AF多價(jià)血清不凝集，首先考慮是否存在表面抗原（Vi抗原），因?yàn)閂i抗原能阻斷O抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生凝集，加熱可將其破壞。應(yīng)將細(xì)菌制成菌懸液，放入沸水中加熱1530分鐘，冷卻后再次做凝集試驗(yàn)。若去除Vi抗原后仍不凝集，此時(shí)應(yīng)考慮是否為AF以外

5、菌群，應(yīng)送專業(yè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行鑒定。7.臨床意義沙門菌主要通過污染的食品和水源經(jīng)口感染，引起人類和動物的沙門菌病，出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀或亞臨床感染，主要有胃腸炎、菌血癥、腸熱癥等。文件編號：生效日期：20111101文件版本：第一版元謀縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室沙門菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件頁碼：22編寫：常曉林20110910審核：文佳瓊20111101批準(zhǔn)：文佳瓊201111018.鑒定流程參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)[1]中國合格評定國家認(rèn)可委員會.CN

6、ASGL23:2008醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南.2008[2]周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解.第二版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2007[3]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006[4]MurrayPR.ManualofCinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASMPress2007[5]ISO15189：2007醫(yī)學(xué)實(shí)