核酸適配體熒光傳感技術(shù)在環(huán)境分析中的應(yīng)用研究.pdf

1、第一章：首先對(duì)核酸適配體與其特點(diǎn)、體外篩選技術(shù)以及在分析領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)行了介紹，然后分別對(duì)環(huán)境內(nèi)分泌干擾物雙酚A、抗生素卡那霉素、毒品可卡因以及各自的分析檢測手段進(jìn)行了概述，重點(diǎn)對(duì)各自的核酸適配體傳感器研究進(jìn)展進(jìn)行了介紹，最后闡明了論文的選題背景和研究內(nèi)容。
　　第二章：雙酚A（BPA）廣泛應(yīng)用于塑料制品和金屬制品涂層等與人類飲食密切相關(guān)的領(lǐng)域，BPA是一種具有擬雌激素作用的內(nèi)分泌干擾物，對(duì)人體健康有嚴(yán)重的危害。本章以小檗堿為熒光探

2、針，利用BPA與其核酸適配體形成G-四鏈體結(jié)構(gòu)從而減少小檗堿與核酸適配體的鍵合使體系熒光降低的原理分別對(duì)兩條核酸適配體鏈進(jìn)行研究，比較兩種適配體體系的分析特性，選出適宜的核酸適配體并對(duì)該核酸適配體傳感體系的選擇性和回收率進(jìn)行研究。該傳感體系對(duì)BPA檢測的線性范圍是0μM—1300μM，檢出限是32nM(S/N=3)，飲用水中的加標(biāo)回收率是92.4％—102.3%，可應(yīng)用于BPA的實(shí)際樣品檢測。
　　第三章：卡那霉素具有抑制細(xì)菌增殖

3、和促進(jìn)畜禽生長發(fā)育的作用，廣泛應(yīng)用于臨床治療和飼料的生產(chǎn)領(lǐng)域，卡那霉素的濫用會(huì)造成耐藥菌株的出現(xiàn)和聽力損傷等危害。本章以小檗堿為熒光探針，利用卡那霉素和其適配體形成發(fā)夾狀結(jié)構(gòu)從而減少小檗堿與核酸適配體的鍵合使體系熒光降低的原理構(gòu)筑了卡那霉素核酸適配體傳感體系。詳細(xì)考察了適配體濃度、體系的酸度及離子強(qiáng)度等對(duì)卡那霉素識(shí)別檢測的影響，并對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化，建立了分析測定卡那霉素的傳感平臺(tái)，在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，體系的熒光強(qiáng)度與卡那霉素濃度呈良好

4、的線性關(guān)系，其線性范圍是5nM—70nM，檢出限為2.3nM(S/N=3)，牛奶樣品中的加標(biāo)回收率是98.3%—101.2%，適合應(yīng)用于實(shí)際樣品檢測。
　　第四章：可卡因是世界公認(rèn)的五大類毒品之一，由于它的濫用已造成了一系列社會(huì)問題，對(duì)可卡因進(jìn)行快速、準(zhǔn)確、靈敏檢測已成為研究熱點(diǎn)。核酸適配體與熒光光譜法結(jié)合具有檢出限低、靈敏度高、特異性識(shí)別等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于分析檢測領(lǐng)域，合適的熒光探針與適配體的選擇成為研究的關(guān)鍵。本章以廉價(jià)免標(biāo)

5、記的小檗堿作為熒光探針，以可卡因核酸適配體的三段寡聚核苷酸鏈作為識(shí)別單元，利用可卡因引起寡聚核苷酸鏈構(gòu)型的變化對(duì)小檗堿熒光發(fā)射的影響，實(shí)現(xiàn)了對(duì)可卡因的分析檢測。詳細(xì)考察了適配體濃度、體系的pH值及離子強(qiáng)度等對(duì)可卡因識(shí)別體系的影響，并對(duì)實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了優(yōu)化，建立了分析測定可卡因的傳感平臺(tái)，在最佳實(shí)驗(yàn)條件下，體系的熒光強(qiáng)度與可卡因濃度呈良好的線性關(guān)系，可卡因分析檢測的線性范圍是為5μM—100μM，檢出限為2.8μM(S/N=3)。進(jìn)一步的研