山楂葉黃酮的提取、純化及分離技術(shù)研究.pdf

1、山楂葉是山楂屬植物的葉片，作為傳統(tǒng)中藥材具有悠久的藥用歷史，其藥用價(jià)值在于具有抗氧化、抗衰老、抗癌、抑菌、消炎、降血糖血壓、預(yù)防心血管疾病等功效。山楂葉中的豐富活性物質(zhì)，如黃酮類化合物及多糖，均是其主要的藥理成分，因此，提取山楂葉中的活性成分，能夠?qū)崿F(xiàn)山楂葉的高值化利用，提高其利用價(jià)值。研究山楂葉有效成分的提取、純化工藝，對(duì)于開發(fā)新型保健食品、藥品及化妝品、提高農(nóng)民收入具有重要的社會(huì)意義和現(xiàn)實(shí)意義。
　　本文以干燥山楂葉為原料，研

2、究了山楂葉成分的提取、純化及分離技術(shù)，其主要研究結(jié)果如下：
　　1.山楂葉最佳采收期前期確定，通過比較不同采收期山楂葉中的黃酮、多糖、蛋白質(zhì)及水浸出物的含量變化，確定山楂葉的最佳采收期為11月初。
　　2.通過單因素實(shí)驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn)確定直接水提法提取山楂葉黃酮的最佳提取工藝條件：料液比1:35，浸提時(shí)間60 min，浸提溫度60℃，溶液pH3.6，提取次數(shù)3次，在此條件下，黃酮的提取率為69.17±0.59％。
　　3.

3、以水為介質(zhì)，采用微波?超聲波聯(lián)合輔助提取法提取山楂葉黃酮，在單因素實(shí)驗(yàn)及PB實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以黃酮提取率為響應(yīng)值，利用BBD響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)確定最佳提取條件：微波時(shí)間63 s，微波功率264 w，料液比1:32，超聲功率540 w，實(shí)際測(cè)得的黃酮提取率為90.68±0.53%。
　　4.利用超聲波輔助雙水相法提取山楂葉黃酮和多糖，以山楂葉黃酮和多糖的提取得率及分配系數(shù)為指標(biāo)，通過單因素實(shí)驗(yàn)篩選出PEG/(NH4)2SO4雙水相體系作為提取

4、溶劑，再結(jié)合BBD響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)，確定超聲波輔助雙水相法提取的最佳工藝條件：在PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)11.5%，(NH4)2SO4質(zhì)量分?jǐn)?shù)14%條件下，超聲處理的條件為料液比1:37，超聲時(shí)間35 min，超聲功率360 w，超聲溫度67℃，在此條件下，黃酮提取得率為2.869%，多糖的提取得率為3.005%。
　　5.通過比較七種不同大孔樹脂對(duì)山楂葉黃酮粗提取液的吸附及解吸效果的影響，篩選出D101大孔樹脂作為山楂葉黃酮純化的最佳樹脂。利用

5、D101樹脂的靜態(tài)及動(dòng)態(tài)吸附解吸實(shí)驗(yàn)，確定 D101樹脂純化山楂葉黃酮的最佳工藝條件：樣液pH5.0，上樣液流速1.0 mL/min，上樣液體積70 mL，40%乙醇為洗脫劑，洗脫流速1.0 mL/min，洗脫劑用量100 mL，純化樣品經(jīng)冷凍干燥后測(cè)其純度為42.4%，較未純化前純度提高2.8倍。
　　6.利用Sephadex LH-20凝膠柱對(duì)D101樹脂純化后的山楂葉黃酮進(jìn)行分離、純化。采用水、20%、40%、60%及無水乙