Aβ25-35對PC12細胞骨架毒性的實驗研究.pdf

1、阿爾茨海默?。ˋlzheimer disease，AD）是一種不可逆性和漸進性的神經(jīng)退行性疾病，是全世界所面臨的一個重要的公共健康問題。目前全世界患有AD的人數(shù)約有3600萬人，在英國，AD占65歲以上人群死亡原因的第6位，而在美國則位居第5位，在印度，60歲以上的人大約有370萬人患有AD；而隨著經(jīng)濟的快速發(fā)展和社會的不斷進步，我國逐漸邁入老齡化社會，老年人口的比例和數(shù)量逐漸增加，AD患者的總數(shù)也逐步增加，目前已超過500萬；而且AD

2、的死亡率非常高，僅次于心血管疾病，腦血管疾病以及癌癥，嚴重影響了人們的健康水平及生活質(zhì)量，給社會和家庭都帶來了巨大的壓力；因此，AD的預防與治療逐漸成為醫(yī)學界研究的熱點，并且也成為全社會所面臨的難題。AD的發(fā)病機制有很多種假說，如淀粉樣蛋白級聯(lián)假說，胰島素假說，軸突運輸障礙假說，膽堿能假說及tau異常磷酸化假說等，而目前普遍認同的是淀粉樣蛋白級聯(lián)假說。淀粉樣蛋白級聯(lián)假說認為，Aβ淀粉樣蛋白在大腦內(nèi)沉積，并產(chǎn)生神經(jīng)毒性，從而觸發(fā)一系列的病

3、理級聯(lián)反應，包括細胞內(nèi)鈣離子濃度升高，炎癥反應，神經(jīng)軸突及突觸的損傷、神經(jīng)原纖維纏結等，導致神經(jīng)功能障礙及細胞死亡。研究證實Aβ可以通過多種途徑多種機制發(fā)揮其神經(jīng)毒性作用，而Aβ的神經(jīng)毒性在細胞骨架方面的影響鮮少有報道。
　　細胞骨架是真核生物細胞中的蛋白纖維網(wǎng)狀體系，包括三個不同的并相互作用的結構，即微管（microtubules）、微絲（microfilament）及中間絲（intermediate filament）。研究發(fā)

4、現(xiàn)，細胞骨架在細胞凋亡過程中變化非常活躍，它們在細胞內(nèi)的狀態(tài)直接影響凋亡信號的終點。近年來的研究發(fā)現(xiàn)細胞骨架對維持神經(jīng)元的結構與功能方面具有重要的意義，而且細胞骨架的異常與多種神經(jīng)退行性疾病的發(fā)生及發(fā)展具有很大的關系。有報道稱AD患者腦中神經(jīng)元微管結構異常，引發(fā)細胞骨架的破壞，造成突觸功能失調(diào)以及神經(jīng)元功能受損，最終導致腦神經(jīng)退行性病變。本實驗以PC12為研究對象，使用Aβ25-35誘導細胞，從細胞骨架的變化來探討Aβ的神經(jīng)毒性作用，進

5、一步揭示AD的病理機制，并且針對細胞骨架作為藥物靶點對AD的針對性治療提供理論依據(jù)。
　　目的：建立阿爾茨海默?。ˋD）的細胞模型，并探討 Aβ25-35對細胞骨架的神經(jīng)毒性機制。
　　方法：采用MTT法檢測不同濃度的Aβ25-35對PC12細胞存活率的影響，應用DAPI染色法和 TUNEL法檢測細胞凋亡，免疫細胞化學法和Phalloidin染色觀察細胞骨架的形態(tài)變化。
　　結果：Aβ25-35經(jīng)過“老化”處理后，可以