魚類QM同源基因克隆與組織表達(dá)研究.pdf

1、QM基因是從人維爾姆斯腫瘤雜合細(xì)胞中首次分離到的,最初認(rèn)為與人維爾姆斯腫瘤抑制相關(guān).在隨后的研究中,人們發(fā)現(xiàn)QM基因產(chǎn)物還具有c-jun等原癌基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、Src家族信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、核糖體構(gòu)型與功能維持等多種生物學(xué)活性,它參與細(xì)胞生長、分化、發(fā)育和凋亡等重要生命活動過程.QM同源基因廣泛地存在于動物、植物以及真菌界.結(jié)構(gòu)分析結(jié)果表明,QM同源基因在進(jìn)化上是比較保守的.在小鼠和人中,QM基因是以多拷貝形式存在的,并且它在多種組織中都有表達(dá).雖然

2、已有的研究表明QM是一種多功能基因,但有關(guān)其具體的生物學(xué)功能與作用機(jī)制尚不很清楚.迄今,魚類中尚未見QM基因的研究報道.該文應(yīng)用生物信息學(xué)和分子克隆等技術(shù),首次從魚類中克隆出QM基因,為QM的分子進(jìn)化以及生物學(xué)功能的深入研究打下基礎(chǔ).我們首先通過電子克隆獲得了斑馬魚QM基因序列信息,然后構(gòu)建了草魚頭腎和脾臟λZAPⅡ cDNA文庫,利用QM基因的保守區(qū)域和載體序列,設(shè)計了系列特異性引物,通過套式和錨定PCR,克隆了草魚QM同源基因,命名

3、為GcQM.該cDNA基因全長751bp,開放閱讀框編碼215個氨基酸,預(yù)測的蛋白質(zhì)大小為24.5kDa.GcQM編碼的多肽與人QM多肽相比,相似性和同一性分別高達(dá)96%和92%;與果蠅相比,也分別有86%和76%.我們對GcQM在草魚主要組織細(xì)胞如腦、心肌、頭腎、脾臟、肝臟、腸和肌肉中的表達(dá)進(jìn)行了研究,同時對草魚經(jīng)出血病病毒(GCHV)、嗜水氣單胞菌感染后各組織中QM的誘生型表達(dá)情況作了探討.結(jié)果表明,GcQM在草魚腦、心肌、脾臟中都