肝細胞癌中NGX6表達與血管生成及超聲造影特征的相關性研究.pdf

1、腫瘤血管生成取決于血管生成因子與抑制因子之間的平衡。這一平衡受原癌基因和抑癌基因的調(diào)節(jié)。肝細胞癌是一種多基因病變，基因方面的研究，可為肝細胞癌預防、診斷、治療及預后提供理論依據(jù)。NGX6基因是新克隆的一個鼻咽癌候選抑癌基因（基因登陸號：AF188239）。前期研究表明NGX6與腫瘤浸潤轉移有關。超聲造影被譽為無創(chuàng)性微循環(huán)血管造影，是超聲醫(yī)學的最新進展。本課題將分子生物學及影像技術結合，探討肝細胞癌NGX6基因表達和超聲造影與血管生成的關

2、系，對于從多方面認識血管生成的規(guī)律及指導基因靶向治療有重要作用。 工作目的： 1、NGX6在肝細胞癌及癌旁組織中的表達及其與臨床病理特征的關系。 2、NGX6在肝細胞癌中的表達與微血管密度（microvesseldensity，MVD）、微血管形態(tài)、VEGFmRNA的關系及其在血管生成中的作用。 3、肝細胞癌超聲造影特征與MVD、微血管形態(tài)、VEGF表達的關系以闡明血管生成及侵潤轉移影像學的分子病理學基礎

3、。 4、肝細胞癌超聲造影特征與NGX6表達的關系，為尋找影響肝細胞癌血管生成靶點及侵潤轉移影像學研究提供基因水平的理論依據(jù)。 資料與方法： 研究對象為2006年1月～2007年10月經(jīng)手術病理證實的肝細胞癌患者45例，術前行超聲造影。采用AcusonSequoia512彩超儀，探頭頻率2.0～6.0MHz，造影軟件CPS（contrastpulsesequences），造影劑聲諾維（SonoVue）。錄制造影全過

4、程，予以QONTRAST-QRADIO軟件分析。術中取新鮮離體肝細胞癌標本，應用RT-PCR檢測NGX6、VEGF在癌及癌旁組織（距離癌灶距離大于2cm的肝組織）表達，免疫組化及Western-blotting檢測VEGF在癌及癌旁組織表達。CD34顯示微血管，記錄MVD，觀測微血管形態(tài)。對肝細胞癌NGX6表達、VEGF、MVD、微血管形態(tài)特征和超聲造影聲像特征的關系統(tǒng)計分析。 結果： 1、癌組織NGX6陽性表達率35.

5、5％（16/45），癌旁組織陽性表達率77.8％（35/45），癌及癌旁組織表達陽性率組間差異有統(tǒng)計學意義（x2=16.335P<0.01），癌組織NGX6表達與淋巴結轉移（x2=5.237，P=0.022）有關。 2、NGX6在肝細胞癌中的表達與MVD（x2=3.919，P<0.05）、VEGFmRNA（x2=10.132，P<0.01）相關聯(lián)，與微血管形態(tài)無關。 3、肝癌超聲造影達峰時間與VEGF（rs=-0.335

6、），MVD（rs=-0.477）有關。峰值強度與VEGF（rs=0.566），MVD（rs=0.569）有關。 4、微血管分型不同組間變低時間有差異（t=2.059，P<0.05）。具有環(huán)條型微血管特征的肝細胞癌門脈相低增強、“快出”廓清模式發(fā)生率高于點線型，門脈相增強表現(xiàn)及廓清模式與微血管分型有關（x2=11.948，P<0.01，C=0.458）。 5、MVD高低與腫瘤強化邊緣特征（x2=7.032，P<0.01，C

7、=0.368），強化范圍變化（x2=5.38，P<0.05，C=0.327），癌栓強化特征（x2=4.148，P<0.05，C=0.291）發(fā)生有關；VEGF與腫瘤強化邊緣特征（x2=3.90，P<0.05，C=0.282），強化范圍變化（x2=6.544，P<0.05，C=0.356）癌栓強化特征（x2=7.039，P<0.01，C=0.368）發(fā)生相關。 6、NGX6mRNA表達與腫瘤強化邊緣特征（x2=10.499，P<0

8、.01，C=0.435），強化范圍變化（x2=5.867，P<0.05，C=0.34），癌栓強化特征（x2=6.749，P<0.01，C=0.361）發(fā)生有關。與廓清模式、放射狀滋養(yǎng)動脈、強化是否完全等特征無關。 結論： 1、NGX6在肝細胞癌及癌旁組織有表達，與淋巴結轉移有關，NGX6基因轉錄水平的表達降低或缺失在原發(fā)性肝細胞癌的發(fā)生過程中起了重要作用。 2、NGX6可能參與肝細胞癌血管生成的調(diào)控，與微血管形態(tài)

9、無關。 3、肝細胞癌造影達峰時間、峰值強度可反映新生血管的狀況。微血管形態(tài)特征是肝細胞癌廓清模式，變低時間長短及“門脈相增強表現(xiàn)”等超聲造影強化及灌注特征的形態(tài)學基礎之一。 4、肝細胞癌強化邊緣特征、強化范圍變化、癌栓強化特征與VEGF表達、MVD有關，將分子特征與超聲造影影像學特點聯(lián)系，為臨床上影像學方法判斷肝細胞癌血管生成及浸潤轉移提供實驗依據(jù)。 5、NGX6mRNA表達與肝細胞癌強化邊緣特征，強化范圍變化，