脂質體介導重組人血管內皮細胞生長抑制因子基因轉染抑制角膜新生血管的實驗研究.pdf

1、分類號jR772∞c袒萄密級：內部學校代碼：11906專量天季樽士學位論文脂質體介導重組人血管內皮細胞生長抑制因子基因轉染抑制角膜新生血管的實驗研究糍等教坪學辮專鵬摩稚鹼交提襲瓣期鹼支答辯瓣渤參辯委員念童席王冰王傳氣教授眼科學20063152006526李鏡海教授結果：1通過計算機自動測序和Westernblotting檢測f的蛋向表達證實成功構建真飲表達的重組人VEGIl51基因；2細胞實驗結果：21光鏡下觀察細胞生長情況：實驗組貼壁

2、的CRL2480細胞在加入陽離子脂質體與重組人VEGIl51的混合液后繼續(xù)培養(yǎng)未見細胞數(shù)量增多并可見許多細胞固縮、斷裂或空泡形成，對照組貼壁的CRL2480細胞大量增殖，鋪滿瓶底，細胞形念典型；22細胞增硝活性的檢測：MTT法可以看出VEGi轉染組細胞的吸光度(oD)值拒備時柏均明顯小于其它三組，而空白載體對照組、陽離了脂質體對照組及空白對照組之組『自J比較無差異性。VEGIl51轉染組對體外培養(yǎng)的CRL2480細胞增蛾缺自明“抑制作用

3、，VEGI的抑制率達412％。3動物實驗結果31VEGI轉染組(A)中新生血管的平均：=：觀時fJ為63天空白載體對照組(B)為31天，陽離予脂質體對照組(C)為32火宅fJ對照組(D)為32火。A組與B、C、D各組比較差別有顯著性(PO05)。32轉染后各時相角膜新生血管及面積可見A組與B、C、D各組比較差別有顯著意義(P005)33組織切片光鏡下見A組角膜上皮完整，角膜水腫角膜基質中有炎性細胞浸澗和新塵血管隨時間推移炎癥細胞和新生m