熱休克腫瘤細(xì)胞上清及EXOSOME中趨化因子的發(fā)現(xiàn)及一種非細(xì)胞結(jié)構(gòu)性新型高效腫瘤疫苗的研究.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文熱休克腫瘤細(xì)胞上清及EXOSOME中趨化因子的發(fā)現(xiàn)及一種非細(xì)胞結(jié)構(gòu)性新型高效腫瘤疫苗的研究姓名：郭軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：曹雪濤2002.5.1a熱休克I中擅細(xì)胞上滑丑Exos0Ⅶi中趨化西干的發(fā)現(xiàn)＆一砷菲細(xì)胞結(jié)殉陛妒坐商啦J|【l：描蛙苗的研究”熱休克腫瘤細(xì)胞上清及EXOSOME中趨化因子的發(fā)現(xiàn)及一種非細(xì)胞結(jié)構(gòu)性新型高效腫瘤疫苗的研究博士生：郭軍導(dǎo)師：曹雪濤教授中文摘要／l惡性腫瘤嚴(yán)重威脅著人

2、類的健康，在各種疾病所致的死亡中，惡陛腫瘤現(xiàn)已＼成為主要病因，并有進(jìn)～步增高的趨勢(shì)。目前的傳統(tǒng)治療方法，雖有一定療效，但卻十分有限。生物治療的研究給腫瘤治療帶來(lái)了新的希望，特別是腫瘤疫苗的研制更成為目前腫瘤治療研究的熱點(diǎn)之一?，F(xiàn)有的比較受到關(guān)注的制備腫瘤疫苗的方法，包括了如各種細(xì)胞因子、共刺激分子、刪q蕾抗原肽等基因修飾的腫瘤細(xì)胞疫苗；體外抗原致敏的或月qt瘤抗原肽基因修飾的樹突狀細(xì)胞疫苗；腫瘤細(xì)胞與抗原提呈細(xì)胞融合疫苗等。這些腫瘤疫苗

3、各有特色，但總體來(lái)說(shuō)，制備工藝復(fù)雜，效果相對(duì)不夠理想。我們?cè)谘芯繜嵝菘说鞍着c腫瘤免疫之間的關(guān)系時(shí)，發(fā)現(xiàn)了腫瘤細(xì)胞經(jīng)熱體克后，其培養(yǎng)上清對(duì)樹突狀細(xì)胞(Dendriticcell，DC)及T淋巴細(xì)胞有明顯的趨化作用，繼而證實(shí)了腫瘤細(xì)胞熱體克后上清中含有多種趨化因子。由于這種趨化作用在熱休克后很快就表現(xiàn)出來(lái)，因而我們推測(cè)可能是腫瘤細(xì)胞通過(guò)某種特殊的分泌形式，將趨化因子排出胞外。進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證實(shí)這種外排形式就是ExOSO～／E，因?yàn)槲覀儼l(fā)現(xiàn)腫瘤

4、細(xì)胞熱休克上清中的EXOSOME含有多種高濃度的趨化因子，而分離出EXOSOME后的上清中卻幾乎檢測(cè)不到趨化因子。同時(shí)，我們還發(fā)現(xiàn)了在熱休克后EXOSOME中含有高水平的MHCI類和II類分子以及多種共刺激分子、粘附分子、腫瘤抗原提呈的伴侶分子HSP70等。由于這種EXOSO～I(xiàn)E來(lái)自于腫瘤細(xì)胞，攜帶有腫瘤抗原，又有幾乎所有目前研制的高教腫瘤疫苗所必須的公刺激信號(hào)的特性，強(qiáng)烈提示這是一種非細(xì)胞性的新型疫苗。接著進(jìn)行的動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)這種