miR495、miR551a靶向干擾SGC7901細(xì)胞PRL-3基因的表達(dá).pdf_第1頁(yè)
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1、目的:構(gòu)建靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表達(dá)載體，觀察其轉(zhuǎn)染胃癌SGC7901細(xì)胞后對(duì)胃癌細(xì)胞PRL-3基因表達(dá)的影響。
　　方法:設(shè)計(jì)并合成兩條針對(duì)PRL-3基因的特異性miRNA495和miRNA551a干擾序列，分別與pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR載體連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，純化并鑒定后利用LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染胃癌SGC7901細(xì)胞，實(shí)時(shí)定量PCR及Western

2、blot技術(shù)鑒定重組體對(duì)PRL-3基因表達(dá)的干擾效果。
　　結(jié)果:針對(duì)PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a干擾質(zhì)粒構(gòu)建成功，胃癌SGC7901細(xì)胞分別轉(zhuǎn)染兩種質(zhì)粒后miRNA495及miRNA551a的表達(dá)明顯升高，并且明顯抑制了PRL-3基因mRNA及蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)論:靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表達(dá)載體構(gòu)建成功，其可有效提高胃癌SGC7901細(xì)胞miRNA495和mi

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