斜帶石斑魚催乳素受體（PRLR）基因組DNA及其5’旁側(cè)序列克隆和PRLR的表達(dá)研究.pdf

1、本文通過GenomeWalkerPCR和基因組PCR，成功地獲得了斜帶石斑魚PRLR基因全長和5’旁側(cè)區(qū)673bp序列。斜帶石斑魚PRLR基因全長10199bp，包含9個外顯子，8個內(nèi)含子。轉(zhuǎn)錄起始位點位于外顯子2上，轉(zhuǎn)錄終止位點位于外顯子9上。在已獲得的5’旁側(cè)區(qū)序列上，沒有TATAbox序列，但存在轉(zhuǎn)錄因子C/EBPβ和Sp1的結(jié)合位點，這與哺乳動物催乳素受體基因啟動子Ⅲ(PⅢ)相似。 Northernblot分析表明：在斜

2、帶石斑魚腸、鰓絲和性腺中都檢測到一條2.37kb的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，其在腸和鰓表達(dá)量較高，在卵巢表達(dá)量比較微弱。此外，在鰓絲中還檢測到了PRLR另外兩種轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，分別為4.62kb和1.19kb。應(yīng)用兩步法RT-PCR結(jié)合Southernblot分析，我們進(jìn)一步研究了PRLR在斜帶石斑魚不同組織和早期發(fā)育時期的表達(dá)情況。 結(jié)果顯示：在檢測的組織中，PRLR都有表達(dá)。在垂體、皮膚、鰓絲中表達(dá)量最高，鰓弓、中腸、后腸、胃、性腺、脂肪表達(dá)量也