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文檔簡介
1、附件6動物源性食品中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的快速檢測膠體金免疫層析法1范圍本方法規(guī)定了動物肌肉組織中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的膠體金免疫層析快速檢測方法。本方法適用于豬肉、牛肉等動物肌肉組織中克倫特羅、萊克多巴胺及沙丁胺醇的快速檢測。2原理本方法采用競爭抑制免疫層析原理。待測樣中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇與膠體金標記的特異性抗體結(jié)合,抑制了抗體和硝酸纖維素膜檢測線(T線)上抗原結(jié)合,從而導致檢測線顏色深淺變化。通過檢測
2、線與質(zhì)控線(C線)顏色深淺比較,對待測樣中克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇進行定性判定。3試劑與材料除另有規(guī)定外,本方法所用試劑均為分析純,水應符合GBT6682二級水規(guī)定。3.1試劑3.1.1甲醇:色譜純。3.1.2氫氧化鈉。3.1.3磷酸二氫鉀。3.1.4磷酸氫二鈉。3.1.5鹽酸。3.1.6氯化鈉。3.1.7氯化鉀。3.1.8三氮化鈉。3.1.9乙二胺四乙酸二鈉。3.1.10三羥甲基氨基甲烷,即Tris。3.1.11乙酸乙酯?!?—
3、—2萊克多巴胺Ractopamine97825257C18H23NO3301.3803沙丁胺醇Salbutamol18559949C13H21NO3239.311注:或等同可溯源物質(zhì)。3.3標準溶液配制3.3.1標準儲備液:精密稱取適量克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇參考物質(zhì)(3.2),分別置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)溶解并稀釋至刻度,搖勻,分別制成濃度為100μgmL的克倫特羅、萊克多巴胺、沙丁胺醇標準儲備液,18℃保存
4、,有效期一年。3.3.2克倫特羅標準中間液(1μgmL):精密量取克倫特羅標準儲備液(100μgmL)(3.3.1)1mL置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為1μgmL的克倫特羅標準中間液,臨用新制。3.3.3克倫特羅標準工作液(20ngmL):精密量取克倫特羅標準中間液(1μgmL)(3.3.2)1mL,置于50mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為20ngmL的克倫特羅標準
5、工作液。臨用新制。3.3.4萊克多巴胺標準中間液(1μgmL):精密量取萊克多巴胺標準儲備液(100μgmL)(3.3.1)1mL置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為1μgmL的萊克多巴胺標準中間液,臨用新制。3.3.5萊克多巴胺標準工作液(20ngmL):精密量取萊克多巴胺標準中間液(1μgmL)(3.3.4)1mL,置于50mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為20ngmL
6、的萊克多巴胺標準工作液。臨用新制。3.3.6沙丁胺醇胺標準中間液(1μgmL):精密量取沙丁胺醇標準儲備液(100μgmL)(3.3.1)1mL置于100mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為1μgmL的沙丁胺醇標準中間液,臨用新制。3.3.7沙丁胺醇標準工作液(20ngmL):精密量取沙丁胺醇標準中間液(1μgmL)(3.3.6)1mL,置于50mL容量瓶中,用甲醇(3.1.1)稀釋至刻度,搖勻,制成濃度為20
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