2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩66頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:從SFRP4/Wnt/β-catenin/FoxO3a/p27通路的角度,研究熊果酸(UA)對AngⅡ誘導(dǎo)A7r5細(xì)胞增殖的抑制作用。
  方法:復(fù)制SD大鼠高脂血癥模型,免疫組化技術(shù)檢測其胸主動脈壁SFRP4的蛋白表達(dá);復(fù)制 AngⅡ(0.1μM)誘導(dǎo)的A7r5細(xì)胞增殖模型,實驗分組為:正常對照組,AngⅡ模型組,UA組(5μM,10μM,20μM),UA組均預(yù)給藥12h后加入AngⅡ造模24h,CCK-8法檢測該時間點細(xì)

2、胞增殖活性;RT-PCR和western blot技術(shù)檢測各組細(xì)胞SFRP4、β-catenin、FoxO3a、p27的mRNA和蛋白水平;免疫熒光技術(shù)觀測β-catenin的胞內(nèi)定位;首次應(yīng)用RNA干擾技術(shù),驗證A7r5細(xì)胞通路級聯(lián)關(guān)系及UA的作用靶標(biāo),設(shè)計分組:AngⅡ模型組、模型+si-SFRP4組、模型+Wnt通路抑制劑XAV939(5μM,預(yù)孵育4h)組、UA組(20μM)、UA+si-SFRP4組、UA+Wnt通路激活劑Li

3、Cl(500μM,預(yù)孵育4h)組;Western blot技術(shù)檢測干擾效率和目的蛋白表達(dá);采用SPSS17.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析。
  結(jié)果:①動物學(xué)研究:免疫組化技術(shù)結(jié)果顯示,大鼠胸主動脈壁存在SFRP4蛋白,且正常組的SFRP4光密度比值高于模型組(P<0.05);②細(xì)胞學(xué)研究:CCK-8結(jié)果顯示,0.1μM AngⅡ誘導(dǎo)24h顯著提高細(xì)胞增殖率,而分別加入5μM、10μM、20μM UA預(yù)保護(hù)12h,均有明顯的細(xì)胞增殖抑制作

4、用(P<0.05);模型+si-sFRP4組的增殖率較模型組升高,且UA+si-SFRP4組增殖率較UA組增高(P<0.05),提示SFRP4與該細(xì)胞增殖呈負(fù)相關(guān),且隨SFRP4表達(dá)減少,UA的抗增殖活性減弱。模型組的SFRP4、FoxO3a、p27的mRNA和蛋白水平較正常對照組均下降,F(xiàn)oxO3a蛋白磷酸化水平升高,且β-catenin的mRNA和蛋白水平升高(P<0.05),免疫熒光結(jié)果顯示,β-catenin蛋白表達(dá)核內(nèi)增多,提

5、示AngⅡ誘導(dǎo)Wnt/β-catenin通路的激活;加入si-SFRP4后,模型組SFRP4蛋白表達(dá)缺失,β-catenin蛋白表達(dá)升高(P<0.05),提示SFRP4負(fù)性調(diào)控β-catenin;與模型組相比,模型+XAV939組β-catenin、p-FoxO3a蛋白表達(dá)下調(diào),F(xiàn)oxO3a、p27表達(dá)增多(P<0.01),提示FoxO3a、p27受上游分子β-catenin的調(diào)控,綜上即A7r5細(xì)胞增殖中存在SFRP4/Wnt/β-c

6、atenin/FoxO3a/p27信號軸的調(diào)控。UA組SFRP4、FoxO3a、p27的mRNA水平和蛋白表達(dá)均較模型組升高,β-catenin的mRNA和蛋白水平下降,β-catenin蛋白的核內(nèi)表達(dá)顯著減少,p-FoxO3a表達(dá)下調(diào)(P<0.05),提示UA可抑制Wnt通路的激活,上調(diào)下游轉(zhuǎn)錄因子;經(jīng)si-SFRP4處理后,UA組SFRP4蛋白表達(dá)沉默,β-catenin的蛋白表達(dá)升高(P<0.05),提示UA抑制Wnt通路涉及到上

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論