琉璃苣籽油提取工藝及其抗氧化活性研究與產(chǎn)品開(kāi)發(fā).pdf

1、琉璃苣籽油是一種富含γ-亞麻酸（γ-linolenic acid，GLA）類的小品種特種油，其不飽和脂肪酸高且脂肪酸組成特殊，并含有多種生理活性物質(zhì)，具有防治心血管疾病、降低膽固醇和抑制癌癥等多種生理保健功能。同時(shí)，琉璃苣籽油因具有抗氧化作用而廣泛應(yīng)用于功能性食品和醫(yī)藥等領(lǐng)域且潛力巨大，然而其抗氧化作用機(jī)制目前尚不明確。秀麗隱桿線蟲（Caenorhabditis elegans）作為模式生物，其具有構(gòu)造簡(jiǎn)單、生命周期短、基因全序列已知且

2、信號(hào)通路高度保守等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛用于生命科學(xué)領(lǐng)域。本研究?jī)?yōu)化了琉璃苣籽油索氏提取工藝，利用秀麗隱桿線蟲探究琉璃苣籽油的抗氧化作用機(jī)理，并制備了琉璃苣籽油脂質(zhì)體，主要研究結(jié)果如下:
　　1、通過(guò)單因素和響應(yīng)面試驗(yàn)優(yōu)化得到琉璃苣籽油提取最佳工藝條件為提取時(shí)間4.16h，提取溶劑體積108.81mL，提取溫度83.15℃，在此條件下琉璃苣籽油提取率達(dá)34.05％，提取的琉璃苣籽油中共鑒定出15種脂肪酸，其中9種不飽和脂肪酸含量達(dá)81.27

3、％，GLA含量占20.96％。琉璃苣籽油酸值為3.04mgKOH/g，碘值150g/100g，皂化值200mgKOH/g，過(guò)氧化值2.0g/100g，旋光率1.4749g/mL。
　　2、不同濃度琉璃苣籽油均能顯著延長(zhǎng)野生型秀麗隱桿線蟲的壽命，增加運(yùn)動(dòng)行為次數(shù)和子代數(shù)。其中，1％琉璃苣籽油組野生型秀麗隱桿線蟲體內(nèi)熒光表達(dá)量明顯減少，表明琉璃苣籽油最適抗氧化作用濃度為1％。相較對(duì)照組，野生型秀麗隱桿線蟲經(jīng)1％琉璃苣籽油處理后，其運(yùn)動(dòng)

4、行為頻率和產(chǎn)卵量增加，線蟲體內(nèi)活性氧自由基的滯留量減少，但其生存率、運(yùn)動(dòng)行為次數(shù)和子代數(shù)目低于0.1％GLA處理組。
　　3、1％琉璃苣籽油處理的daf-2突變體線蟲較野生型線蟲和對(duì)照組daf-2突變體線蟲吞咽和排泄頻率顯著增加，熱應(yīng)激存活率和存活時(shí)間顯著增加，且不影響身體彎曲。1％琉璃苣籽油對(duì)daf-2突變體線蟲抗氧化作用較野生型線蟲和對(duì)照組daf-2突變體線蟲顯著。1％琉璃苣籽油處理的daf-16突變體線蟲較野生型線蟲的生存率

5、降低且顯著縮短其壽命，而1％琉璃苣籽油處理的daf-16突變體線蟲較對(duì)照組daf-16突變體線蟲的身體彎曲頻率顯著增加，應(yīng)激存活率和存活時(shí)間降低，但對(duì)其頭部擺動(dòng)頻率、吞咽頻率和排泄頻率不影響。同時(shí)，利用逆轉(zhuǎn)錄及實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)測(cè)得1％琉璃苣籽油處理的野生型線蟲的daf-2基因的表達(dá)量較對(duì)照組顯著升高。說(shuō)明1％琉璃苣籽油通過(guò)上調(diào)daf-2基因?qū)崿F(xiàn)抗氧化作用。
　　4、研究乙醇注入法、薄膜分散法、乙醇注入-超聲法和薄膜分散-超聲