利用脂肪細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞特異性敲除小鼠研究Metrnl表達(dá)和功能.pdf

1、第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文利用脂肪細(xì)胞和腸上皮細(xì)胞特異性敲除小鼠研究M e t r n l 表達(dá)和功能U s i n g A d i p o c y t e - ·a n d I n t e s t i n eE p i t h e l i u m - - S p e c i f i cK n o c k o u t M i c e t oS t u d y E x p r e s s i o n a n d F u n c t

2、 i o no fM e t r n l研究生：范茂兵導(dǎo) 師：繆朝玉教授協(xié)助指導(dǎo)：李志勇講師專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)：藥理學(xué)培養(yǎng)單位：第二軍醫(yī)大學(xué)藥學(xué)院藥理學(xué)教研室基金資助：國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)1 | ( N 0 8 1 1 3 0 0 6 1 )國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目( N Q 8 12 0 2 5 7 2 )國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目( 施8 1 3 7 3 4 1 4 )二0 一六年五月目 錄摘要????????????????????

3、???????????????????????．1 ．A b s t r a c t ?????????????????????????????????????????．．．3 ．縮略詞表???????????????????????????????．6 ．前言???????????????????????????????????????????．7 ． 日U 舌?????????????????????????????????????

4、??????- ／一一、實(shí)驗(yàn)材料????????????????????????????．．1 1 ．( 一) 試劑和耗材?????????????????????????．．1 1 ．( 二) 實(shí)驗(yàn)儀器??????????????????????????．一1 2 ．二、實(shí)驗(yàn)方法????????????????????????????．．．1 4 ．( 一) 小鼠基因型鑒定???????????????????????．．1 4 ．(

5、 二) 小鼠體重、食量記錄和能量消耗測(cè)定??????????????．．1 5 一( 三) 葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)???????????????????????．．1 5 ．( 四) 胰島素耐量實(shí)驗(yàn)???????????????????????．．1 6 ．( 五) 小鼠血液標(biāo)本和腸液標(biāo)本采集?????????????????．．1 7 ．( 六) 組織形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)???????????????????????．．1 7 ．( 七) M e t

6、m l 等基因m R N A 表達(dá)檢測(cè)?????????????????．1 9 ．( 八) M e t r n l 免疫組織化學(xué)檢測(cè)???????????????????．．2 1 -( 九) M e t m l E L I S A 檢測(cè)?????????????????????????????．．．2 1 ．三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論?????????????????????????．．2 4 ．( 一) M e t r n l E L I

7、 S A 方法學(xué)考察???????????????????．．2 4 ．1 ．檢測(cè)方法的靈敏度??????????????????????．．．2 4 ．2 ．檢測(cè)方法的精密度??????????????????????．．．2 4 ．3 ．檢測(cè)上限的延伸???????????????????????．．．2 5 ．4 ．檢測(cè)方法的種屬特異性????????????????????．．．2 5 ．5 ．不同血液的采集方法對(duì)M e t m

8、 l 的影響??????????????．．．2 6 一( 二) M e t m l 脂肪細(xì)胞特敲小鼠培育和胰島素敏感性研究????????．．2 7 ．1 ．M e t m l 脂肪細(xì)胞特異性敲除小鼠的培育??????????????．2 7 —2 ．M e t m l 脂肪細(xì)胞特異性敲除小鼠的驗(yàn)證??????????????．2 7 ．3 ．正常飲食下，M e t r n l 對(duì)小鼠體重、食量和能量消耗的影響??????．2 8 ．